{"id":136,"date":"2019-03-31T10:00:41","date_gmt":"2019-03-31T03:00:41","guid":{"rendered":"http:\/\/dnape.online\/?p=136"},"modified":"2023-05-12T17:09:13","modified_gmt":"2023-05-12T10:09:13","slug":"rre-glai","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/dnape.online\/ru\/2019\/03\/rre-glai\/","title":{"rendered":"\u0421\u0420\u0410\u0412\u041d\u0415\u041d\u0418\u0415 \u0421\u0423\u0411\u0421\u0422\u0420\u0410\u0422\u041d\u041e\u0419 \u0421\u041f\u0415\u0426\u0418\u0424\u0418\u0427\u041d\u041e\u0421\u0422\u0418 \u0420\u0415\u041a\u041e\u041c\u0411\u0418\u041d\u0410\u041d\u0422\u041d\u041e\u0419 \u0421\u0410\u0419\u0422-\u0421\u041f\u0415\u0426\u0418\u0424\u0418\u0427\u0415\u0421\u041a\u041e\u0419 \u041c\u0415\u0422\u0418\u041b\u0417\u0410\u0412\u0418\u0421\u0418\u041c\u041e\u0419 \u0414\u041d\u041a-\u042d\u041d\u0414\u041e\u041d\u0423\u041a\u041b\u0415\u0410\u0417\u042b GlaI \u0418 \u041d\u0410\u0422\u0418\u0412\u041d\u041e\u0413\u041e \u0424\u0415\u0420\u041c\u0415\u041d\u0422\u0410, \u0412\u042b\u0414\u0415\u041b\u0415\u041d\u041d\u041e\u0413\u041e \u0418\u0417 \u0428\u0422\u0410\u041c\u041c\u0410 Glacial ice bacterium"},"content":{"rendered":"<!-- coins metadata inserted by kblog-metadata -->\n<span class=\"Z3988\" title=\"ctx_ver=Z39.88-2004&amp;rft_val_fmt=info%3Aofi%2Ffmt%3Akev%3Amtx%3Adc&amp;rfr_id=kblog-metadata.php&amp;rft.title=%D0%A1%D0%A0%D0%90%D0%92%D0%9D%D0%95%D0%9D%D0%98%D0%95+%D0%A1%D0%A3%D0%91%D0%A1%D0%A2%D0%A0%D0%90%D0%A2%D0%9D%D0%9E%D0%99+%D0%A1%D0%9F%D0%95%D0%A6%D0%98%D0%A4%D0%98%D0%A7%D0%9D%D0%9E%D0%A1%D0%A2%D0%98+%D0%A0%D0%95%D0%9A%D0%9E%D0%9C%D0%91%D0%98%D0%9D%D0%90%D0%9D%D0%A2%D0%9D%D0%9E%D0%99+%D0%A1%D0%90%D0%99%D0%A2-%D0%A1%D0%9F%D0%95%D0%A6%D0%98%D0%A4%D0%98%D0%A7%D0%95%D0%A1%D0%9A%D0%9E%D0%99+%D0%9C%D0%95%D0%A2%D0%98%D0%9B%D0%97%D0%90%D0%92%D0%98%D0%A1%D0%98%D0%9C%D0%9E%D0%99+%D0%94%D0%9D%D0%9A-%D0%AD%D0%9D%D0%94%D0%9E%D0%9D%D0%A3%D0%9A%D0%9B%D0%95%D0%90%D0%97%D0%AB+GlaI+%D0%98+%D0%9D%D0%90%D0%A2%D0%98%D0%92%D0%9D%D0%9E%D0%93%D0%9E+%D0%A4%D0%95%D0%A0%D0%9C%D0%95%D0%9D%D0%A2%D0%90%2C+%D0%92%D0%AB%D0%94%D0%95%D0%9B%D0%95%D0%9D%D0%9D%D0%9E%D0%93%D0%9E+%D0%98%D0%97+%D0%A8%D0%A2%D0%90%D0%9C%D0%9C%D0%90+Glacial+ice+bacterium&amp;rft.source=%D0%94%D0%9D%D0%9A-%D1%83%D0%B7%D0%BD%D0%B0%D1%8E%D1%89%D0%B8%D0%B5+%D1%84%D0%B5%D1%80%D0%BC%D0%B5%D0%BD%D1%82%D1%8B&amp;rft.date=2019-03-31&amp;rft.identifier=https%3A%2F%2Fdnape.online%2Fru%2F2019%2F03%2Frre-glai%2F&amp;rft.au=%D0%92.%D0%90.+%D0%A7%D0%B5%D1%80%D0%BD%D1%83%D1%85%D0%B8%D0%BD&amp;rft.au=%D0%92.%D0%A1.+%D0%94%D0%B5%D0%B4%D0%BA%D0%BE%D0%B2&amp;rft.au=%D0%94.%D0%90.+%D0%93%D0%BE%D0%BD%D1%87%D0%B0%D1%80&amp;rft.au=%D0%9C.%D0%90.+%D0%90%D0%B1%D0%B4%D1%83%D1%80%D0%B0%D1%88%D0%B8%D1%82%D0%BE%D0%B2&amp;rft.au=%D0%90.%D0%93.+%D0%90%D0%BA%D0%B8%D1%88%D0%B5%D0%B2&amp;rft.au=%D0%A2.%D0%9D.+%D0%9D%D0%B0%D1%8F%D0%BA%D1%88%D0%B8%D0%BD%D0%B0&amp;rft.au=%D0%95.%D0%9D.+%D0%9B%D0%BE%D0%BC%D0%B0%D0%BA%D0%BE%D0%B2%D1%81%D0%BA%D0%B0%D1%8F&amp;rft.au=%D0%A1.%D0%A5.+%D0%94%D0%B5%D0%B3%D1%82%D1%8F%D1%80%D0%B5%D0%B2&amp;rft.format=text&amp;rft.language=English\"><\/span><p>[vc_row][vc_column][vc_column_text]<strong>\u0412.\u0410. \u0427\u0435\u0440\u043d\u0443\u0445\u0438\u043d, \u0412.\u0421. \u0414\u0435\u0434\u043a\u043e\u0432, \u0414.\u0410. \u0413\u043e\u043d\u0447\u0430\u0440, \u041c.\u0410. \u0410\u0431\u0434\u0443\u0440\u0430\u0448\u0438\u0442\u043e\u0432, \u0410.\u0413. \u0410\u043a\u0438\u0448\u0435\u0432, \u0422.\u041d. \u041d\u0430\u044f\u043a\u0448\u0438\u043d\u0430, \u0415.\u041d. \u041b\u043e\u043c\u0430\u043a\u043e\u0432\u0441\u043a\u0430\u044f, \u0421.\u0425. \u0414\u0435\u0433\u0442\u044f\u0440\u0435\u0432*<\/strong><\/p>\n<p>\u041e\u041e\u041e \u00ab\u0421\u0438\u0431\u042d\u043d\u0437\u0430\u0439\u043c\u00bb, 630117, \u041d\u043e\u0432\u043e\u0441\u0438\u0431\u0438\u0440\u0441\u043a, \u0420\u043e\u0441\u0441\u0438\u044f<\/p>\n<p>\u0412 \u043d\u0430\u0441\u0442\u043e\u044f\u0449\u0435\u0439 \u0440\u0430\u0431\u043e\u0442\u0435 \u043e\u043f\u0438\u0441\u0430\u043d\u043e \u043a\u043b\u043e\u043d\u0438\u0440\u043e\u0432\u0430\u043d\u0438\u0435 \u0441\u0430\u0439\u0442-\u0441\u043f\u0435\u0446\u0438\u0444\u0438\u0447\u0435\u0441\u043a\u043e\u0439 \u043c\u0435\u0442\u0438\u043b\u0437\u0430\u0432\u0438\u0441\u0438\u043c\u043e\u0439 \u0414\u041d\u041a-\u044d\u043d\u0434\u043e\u043d\u0443\u043a\u043b\u0435\u0430\u0437\u044b GlaI \u0438 \u043f\u0440\u043e\u0432\u0435\u0434\u0435\u043d\u043e \u0441\u0440\u0430\u0432\u043d\u0435\u043d\u0438\u0435 \u0441\u0443\u0431\u0441\u0442\u0440\u0430\u0442\u043d\u043e\u0439 \u0441\u043f\u0435\u0446\u0438\u0444\u0438\u0447\u043d\u043e\u0441\u0442\u0438 \u0440\u0435\u043a\u043e\u043c\u0431\u0438\u043d\u0430\u043d\u0442\u043d\u043e\u0433\u043e \u0438 \u043d\u0430\u0442\u0438\u0432\u043d\u043e\u0433\u043e \u0444\u0435\u0440\u043c\u0435\u043d\u0442\u043e\u0432. \u041f\u0440\u043e\u0432\u0435\u0434\u0451\u043d\u043d\u044b\u0439 \u0430\u043d\u0430\u043b\u0438\u0437 \u0441\u0432\u043e\u0439\u0441\u0442\u0432 \u0440\u0435\u043a\u043e\u043c\u0431\u0438\u043d\u0430\u043d\u0442\u043d\u043e\u0439 \u044d\u043d\u0434\u043e\u043d\u0443\u043a\u043b\u0435\u0430\u0437\u044b GlaI \u043f\u043e\u043a\u0430\u0437\u0430\u043b, \u0447\u0442\u043e \u0441\u0443\u0431\u0441\u0442\u0440\u0430\u0442\u043d\u0430\u044f \u0441\u043f\u0435\u0446\u0438\u0444\u0438\u0447\u043d\u043e\u0441\u0442\u044c \u043d\u0430\u0442\u0438\u0432\u043d\u043e\u0433\u043e \u0438 \u0440\u0435\u043a\u043e\u043c\u0431\u0438\u043d\u0430\u043d\u0442\u043d\u043e\u0433\u043e \u0444\u0435\u0440\u043c\u0435\u043d\u0442\u0430 \u043d\u0435 \u043e\u0442\u043b\u0438\u0447\u0430\u044e\u0442\u0441\u044f, \u043d\u043e, \u0432\u0432\u0438\u0434\u0443 \u0431\u043e\u043b\u044c\u0448\u0435\u0433\u043e \u043a\u043e\u043b\u0438\u0447\u0435\u0441\u0442\u0432\u0430 \u0444\u0435\u0440\u043c\u0435\u043d\u0442\u0430 \u0432 \u0440\u0435\u043a\u043e\u043c\u0431\u0438\u043d\u0430\u043d\u0442\u043d\u043e\u043c \u0448\u0442\u0430\u043c\u043c\u0435, \u0435\u0433\u043e \u043a\u043e\u043d\u0446\u0435\u043d\u0442\u0440\u0430\u0446\u0438\u044f \u0432 \u043a\u043e\u043d\u0435\u0447\u043d\u043e\u043c \u043f\u0440\u0435\u043f\u0430\u0440\u0430\u0442\u0435 \u0431\u043e\u043b\u0435\u0435 \u0447\u0435\u043c \u0432 10 \u0440\u0430\u0437 \u043f\u0440\u0435\u0432\u044b\u0448\u0430\u0435\u0442 \u043a\u043e\u043d\u0446\u0435\u043d\u0442\u0440\u0430\u0446\u0438\u044e \u043d\u0430\u0442\u0438\u0432\u043d\u043e\u0433\u043e \u0444\u0435\u0440\u043c\u0435\u043d\u0442\u0430.<\/p>\n<p>* \u0410\u0432\u0442\u043e\u0440 \u0434\u043b\u044f \u043f\u0435\u0440\u0435\u043f\u0438\u0441\u043a\u0438. E-mail: degt@sibenzyme.com<\/p>\n<p><u>\u041f\u0440\u0438\u043d\u044f\u0442\u044b\u0435 \u0441\u043e\u043a\u0440\u0430\u0449\u0435\u043d\u0438\u044f:<\/u> 5mC \u2013 5-\u043c\u0435\u0442\u0438\u043b\u0446\u0438\u0442\u043e\u0437\u0438\u043d, MD-\u044d\u043d\u0434\u043e\u043d\u0443\u043a\u043b\u0435\u0430\u0437\u0430 \u2013 \u043c\u0435\u0442\u0438\u043b\u0437\u0430\u0432\u0438\u0441\u0438\u043c\u0430\u044f \u0441\u0430\u0439\u0442-\u0441\u043f\u0435\u0446\u0438\u0444\u0438\u0447\u0435\u0441\u043a\u0430\u044f \u0414\u041d\u041a-\u044d\u043d\u0434\u043e\u043d\u0443\u043a\u043b\u0435\u0430\u0437\u0430, \u0414\u0422\u0422 \u2013 \u0434\u0438\u0442\u0438\u043e\u0442\u0440\u0435\u0438\u0442\u043e\u043b, \u041f\u0410\u0410\u0413 \u2013 \u043f\u043e\u043b\u0438\u0430\u043a\u0440\u0438\u043b\u0430\u043c\u0438\u0434\u043d\u044b\u0439 \u0433\u0435\u043b\u044c, \u043f.\u043d. \u2013 \u043f\u0430\u0440\u044b \u043d\u0443\u043a\u043b\u0435\u043e\u0442\u0438\u0434\u043e\u0432, \u0422\u0440\u0438\u0441 \u2013 \u0442\u0440\u0438\u0441-(\u043e\u043a\u0441\u0438\u043c\u0435\u0442\u0438\u043b)-\u0430\u043c\u0438\u043d\u043e\u043c\u0435\u0442\u0430\u043d, \u042d\u0414\u0422\u0410 \u2013 \u044d\u0442\u0438\u043b\u0435\u043d\u0434\u0438\u0430\u043c\u0438\u043d\u0442\u0435\u0442\u0440\u0430\u0443\u043a\u0441\u0443\u0441\u043d\u0430\u044f \u043a\u0438\u0441\u043b\u043e\u0442\u0430, BSA \u2013 \u0431\u044b\u0447\u0438\u0439 \u0441\u044b\u0432\u043e\u0440\u043e\u0442\u043e\u0447\u043d\u044b\u0439 \u0430\u043b\u044c\u0431\u0443\u043c\u0438\u043d, DMSO \u2013 \u0434\u0438\u043c\u0435\u0442\u0438\u043b\u0441\u0443\u043b\u044c\u0444\u043e\u043a\u0441\u0438\u0434, IPTG \u2013 \u0418\u0437\u043e\u043f\u0440\u043e\u043f\u0438\u043b-\u0431\u0435\u0442\u0430-D-\u0442\u0438\u043e\u0433\u0430\u043b\u0430\u043a\u0442\u043e\u043f\u0438\u0440\u0430\u043d\u043e\u0437\u0438\u0434.[\/vc_column_text][vc_column_text]<\/p>\n<h2>\u0412\u0412\u0415\u0414\u0415\u041d\u0418\u0415<\/h2>\n<p>\u041c\u0435\u0442\u0438\u043b\u0437\u0430\u0432\u0438\u0441\u0438\u043c\u044b\u043c\u0438 \u0441\u0430\u0439\u0442-\u0441\u043f\u0435\u0446\u0438\u0444\u0438\u0447\u0435\u0441\u043a\u0438\u043c\u0438 \u0414\u041d\u041a-\u044d\u043d\u0434\u043e\u043d\u0443\u043a\u043b\u0435\u0430\u0437\u0430\u043c\u0438, \u0438\u043b\u0438 MD-\u044d\u043d\u0434\u043e\u043d\u0443\u043a\u043b\u0435\u0430\u0437\u0430\u043c\u0438 (MD \u2013 <em>methyl<\/em> <em>dependent<\/em> (\u0430\u043d\u0433\u043b.)) \u044f\u0432\u043b\u044f\u044e\u0442\u0441\u044f \u0444\u0435\u0440\u043c\u0435\u043d\u0442\u044b, \u043a\u043e\u0442\u043e\u0440\u044b\u0435 \u0443\u0437\u043d\u0430\u044e\u0442 \u0438 \u0440\u0430\u0441\u0449\u0435\u043f\u043b\u044f\u044e\u0442 \u043e\u043f\u0440\u0435\u0434\u0435\u043b\u0435\u043d\u043d\u044b\u0435 \u043c\u0435\u0442\u0438\u043b\u0438\u0440\u043e\u0432\u0430\u043d\u043d\u044b\u0435 \u043f\u043e\u0441\u043b\u0435\u0434\u043e\u0432\u0430\u0442\u0435\u043b\u044c\u043d\u043e\u0441\u0442\u0438 \u0414\u041d\u041a \u0438 \u043d\u0435 \u0433\u0438\u0434\u0440\u043e\u043b\u0438\u0437\u0443\u044e\u0442 \u043d\u0435\u043c\u043e\u0434\u0438\u0444\u0438\u0446\u0438\u0440\u043e\u0432\u0430\u043d\u043d\u0443\u044e \u0414\u041d\u041a [1]. \u041f\u043e \u0441\u0432\u043e\u0438\u043c \u0441\u0432\u043e\u0439\u0441\u0442\u0432\u0430\u043c \u044d\u0442\u0438 \u0444\u0435\u0440\u043c\u0435\u043d\u0442\u044b \u043f\u043e\u0445\u043e\u0436\u0438 \u043d\u0430 \u0445\u043e\u0440\u043e\u0448\u043e \u0438\u0437\u0443\u0447\u0435\u043d\u043d\u044b\u0435 \u044d\u043d\u0434\u043e\u043d\u0443\u043a\u043b\u0435\u0430\u0437\u044b \u0440\u0435\u0441\u0442\u0440\u0438\u043a\u0446\u0438\u0438, \u0432 \u043a\u0430\u0447\u0435\u0441\u0442\u0432\u0435 \u043a\u043e\u0444\u0430\u043a\u0442\u043e\u0440\u043e\u0432 \u0438\u043c \u043d\u0435\u043e\u0431\u0445\u043e\u0434\u0438\u043c\u044b \u0442\u043e\u043b\u044c\u043a\u043e \u0438\u043e\u043d\u044b \u043c\u0430\u0433\u043d\u0438\u044f. \u0424\u0435\u0440\u043c\u0435\u043d\u0442 GlaI, \u0432\u044b\u0434\u0435\u043b\u0435\u043d\u043d\u044b\u0439 \u0438\u0437 \u0431\u0430\u043a\u0442\u0435\u0440\u0438\u0430\u043b\u044c\u043d\u043e\u0433\u043e \u0448\u0442\u0430\u043c\u043c\u0430 <em>Glacial<\/em> <em>ice<\/em> <em>bacterium<\/em>, \u044f\u0432\u043b\u044f\u0435\u0442\u0441\u044f MD-\u044d\u043d\u0434\u043e\u043d\u0443\u043a\u043b\u0435\u0430\u0437\u043e\u0439, \u043a\u043e\u0442\u043e\u0440\u0430\u044f \u0443\u0437\u043d\u0430\u0435\u0442 \u043f\u043e\u0441\u043b\u0435\u0434\u043e\u0432\u0430\u0442\u0435\u043b\u044c\u043d\u043e\u0441\u0442\u044c \u0414\u041d\u041a 5\u2019-R(5mC)GY-3\u2019 (\u0433\u0434\u0435 R \u2013 \u043f\u0443\u0440\u0438\u043d, Y \u2013 \u043f\u0438\u0440\u0438\u043c\u0438\u0434\u0438\u043d) \u043f\u0440\u0438 \u043d\u0430\u043b\u0438\u0447\u0438\u0438 5-\u043c\u0435\u0442\u0438\u043b\u0446\u0438\u0442\u043e\u0437\u0438\u043d\u0430 \u0432 \u043a\u043e\u043c\u043f\u043b\u0435\u043c\u0435\u043d\u0442\u0430\u0440\u043d\u043e\u0439 \u0446\u0435\u043f\u0438 \u0414\u041d\u041a, \u0438 \u0433\u0438\u0434\u0440\u043e\u043b\u0438\u0437\u0443\u0435\u0442 \u043e\u0431\u0435 \u0446\u0435\u043f\u0438 \u0414\u041d\u041a \u043f\u043e\u0441\u0435\u0440\u0435\u0434\u0438\u043d\u0435 \u0441\u0430\u0439\u0442\u0430 \u0441 \u043e\u0431\u0440\u0430\u0437\u043e\u0432\u0430\u043d\u0438\u0435\u043c \u0442\u0443\u043f\u044b\u0445 \u043a\u043e\u043d\u0446\u043e\u0432 [2]. \u0414\u041d\u041a-\u043c\u0435\u0442\u0438\u043b\u0442\u0440\u0430\u043d\u0441\u0444\u0435\u0440\u0430\u0437\u0430 DNMT3 \u043c\u043b\u0435\u043a\u043e\u043f\u0438\u0442\u0430\u044e\u0449\u0438\u0445 \u0438 \u0447\u0435\u043b\u043e\u0432\u0435\u043a\u0430 \u043c\u0435\u0442\u0438\u043b\u0438\u0440\u0443\u0435\u0442 \u0414\u041d\u041a de novo \u0441 \u043e\u0431\u0440\u0430\u0437\u043e\u0432\u0430\u043d\u0438\u0435\u043c \u0438\u043c\u0435\u043d\u043d\u043e \u043f\u043e\u0441\u043b\u0435\u0434\u043e\u0432\u0430\u0442\u0435\u043b\u044c\u043d\u043e\u0441\u0442\u0438 5\u2019-R(5mC)GY-3\u2019 [3], \u0432\u0432\u0438\u0434\u0443 \u0447\u0435\u0433\u043e \u0444\u0435\u0440\u043c\u0435\u043d\u0442 GlaI \u043d\u0430\u0448\u0435\u043b \u043f\u0440\u0438\u043c\u0435\u043d\u0435\u043d\u0438\u0435 \u0432 \u044d\u043f\u0438\u0433\u0435\u043d\u0435\u0442\u0438\u0447\u0435\u0441\u043a\u043e\u0439 \u0414\u041d\u041a-\u0434\u0438\u0430\u0433\u043d\u043e\u0441\u0442\u0438\u043a\u0435 \u0438 \u0438\u0441\u043f\u043e\u043b\u044c\u0437\u0443\u0435\u0442\u0441\u044f \u0434\u043b\u044f \u043e\u043f\u0440\u0435\u0434\u0435\u043b\u0435\u043d\u0438\u044f \u0441\u0442\u0430\u0442\u0443\u0441\u0430 \u043c\u0435\u0442\u0438\u043b\u0438\u0440\u043e\u0432\u0430\u043d\u0438\u044f \u043e\u0442\u0434\u0435\u043b\u044c\u043d\u044b\u0445 \u0441\u0430\u0439\u0442\u043e\u0432 \u0438\u043b\u0438 \u0444\u0440\u0430\u0433\u043c\u0435\u043d\u0442\u043e\u0432 \u0414\u041d\u041a [4,5], \u0430 \u0442\u0430\u043a\u0436\u0435 \u0434\u043b\u044f \u0443\u0441\u0442\u0430\u043d\u043e\u0432\u043b\u0435\u043d\u0438\u044f \u044d\u043f\u0438\u0433\u0435\u043d\u043e\u043c\u0430 \u0447\u0435\u043b\u043e\u0432\u0435\u043a\u0430 [6]. \u041f\u0440\u0438 \u0438\u0441\u043f\u043e\u043b\u044c\u0437\u043e\u0432\u0430\u043d\u0438\u0438 GlaI \u0432 \u044d\u043f\u0438\u0433\u0435\u043d\u0435\u0442\u0438\u0447\u0435\u0441\u043a\u043e\u0439 \u0414\u041d\u041a-\u0434\u0438\u0430\u0433\u043d\u043e\u0441\u0442\u0438\u043a\u0435 \u0434\u043e\u043b\u0436\u0435\u043d \u043f\u0440\u043e\u0438\u0441\u0445\u043e\u0434\u0438\u0442\u044c \u043f\u043e\u043b\u043d\u044b\u0439 \u0433\u0438\u0434\u0440\u043e\u043b\u0438\u0437 \u0430\u043d\u0430\u043b\u0438\u0437\u0438\u0440\u0443\u0435\u043c\u044b\u0445 \u043e\u0431\u0440\u0430\u0437\u0446\u043e\u0432 \u0414\u041d\u041a, \u0434\u043b\u044f \u0447\u0435\u0433\u043e \u043d\u0435\u043e\u0431\u0445\u043e\u0434\u0438\u043c\u0430 \u0432\u044b\u0441\u043e\u043a\u0430\u044f \u043a\u043e\u043d\u0446\u0435\u043d\u0442\u0440\u0430\u0446\u0438\u044f \u0444\u0435\u0440\u043c\u0435\u043d\u0442\u0430. \u041e\u0434\u043d\u0430\u043a\u043e, \u043f\u0440\u0438 \u0432\u044b\u0434\u0435\u043b\u0435\u043d\u0438\u0438 \u0444\u0435\u0440\u043c\u0435\u043d\u0442\u0430 \u0438\u0437 \u0448\u0442\u0430\u043c\u043c\u0430 <em>Glacial<\/em> <em>ice<\/em> <em>bacterium<\/em> \u0434\u043b\u044f \u043f\u043e\u043b\u0443\u0447\u0435\u043d\u0438\u044f \u0432\u044b\u0441\u043e\u043a\u043e\u0430\u043a\u0442\u0438\u0432\u043d\u043e\u0433\u043e \u043f\u0440\u0435\u043f\u0430\u0440\u0430\u0442\u0430 \u0444\u0435\u0440\u043c\u0435\u043d\u0442\u0430 \u0442\u0440\u0435\u0431\u0443\u0435\u0442\u0441\u044f \u0431\u043e\u043b\u044c\u0448\u043e\u0435 \u043a\u043e\u043b\u0438\u0447\u0435\u0441\u0442\u0432\u043e \u0431\u0438\u043e\u043c\u0430\u0441\u0441\u044b \u043a\u043b\u0435\u0442\u043e\u043a. \u041a\u043b\u043e\u043d\u0438\u0440\u043e\u0432\u0430\u043d\u0438\u0435 \u0433\u0435\u043d\u0430 GlaI \u0432 <em>E<\/em><em>.<\/em><em>coli<\/em> \u043f\u043e\u0437\u0432\u043e\u043b\u044f\u0435\u0442 \u0441\u0443\u0449\u0435\u0441\u0442\u0432\u0435\u043d\u043d\u043e \u043f\u043e\u0432\u044b\u0441\u0438\u0442\u044c \u0441\u043e\u0434\u0435\u0440\u0436\u0430\u043d\u0438\u0435 \u0444\u0435\u0440\u043c\u0435\u043d\u0442\u0430 \u0432 \u0431\u0438\u043e\u043c\u0430\u0441\u0441\u0435 \u0438 \u043f\u043e\u043b\u0443\u0447\u0438\u0442\u044c \u0432\u044b\u0441\u043e\u043a\u043e\u0430\u043a\u0442\u0438\u0432\u043d\u044b\u0439 \u0440\u0435\u043a\u043e\u043c\u0431\u0438\u043d\u0430\u043d\u0442\u043d\u044b\u0439 \u0444\u0435\u0440\u043c\u0435\u043d\u0442 \u0438\u0437 \u0441\u0440\u0430\u0432\u043d\u0438\u0442\u0435\u043b\u044c\u043d\u043e \u043d\u0435\u0431\u043e\u043b\u044c\u0448\u043e\u0433\u043e \u043a\u043e\u043b\u0438\u0447\u0435\u0441\u0442\u0432\u0430 \u043a\u043b\u0435\u0442\u043e\u043a. \u041c\u0435\u0442\u0438\u043b\u0437\u0430\u0432\u0438\u0441\u0438\u043c\u044b\u0435 \u0441\u0430\u0439\u0442-\u0441\u043f\u0435\u0446\u0438\u0444\u0438\u0447\u0435\u0441\u043a\u0438\u0435 \u0414\u041d\u041a-\u044d\u043d\u0434\u043e\u043d\u0443\u043a\u043b\u0435\u0430\u0437\u044b \u044f\u0432\u043b\u044f\u044e\u0442\u0441\u044f \u043d\u043e\u0432\u044b\u043c\u0438 \u0438 \u043c\u0430\u043b\u043e\u0438\u0437\u0443\u0447\u0435\u043d\u043d\u044b\u043c\u0438 \u0444\u0435\u0440\u043c\u0435\u043d\u0442\u0430\u043c\u0438, \u0432 \u0441\u0432\u044f\u0437\u0438 \u0441 \u0447\u0435\u043c, \u043c\u044b \u043f\u0440\u043e\u0432\u0435\u043b\u0438 \u0441\u0440\u0430\u0432\u043d\u0435\u043d\u0438\u0435 \u0441\u0443\u0431\u0441\u0442\u0440\u0430\u0442\u043d\u043e\u0439 \u0441\u043f\u0435\u0446\u0438\u0444\u0438\u0447\u043d\u043e\u0441\u0442\u0438 \u043d\u0430\u0442\u0438\u0432\u043d\u043e\u0433\u043e \u0438 \u0440\u0435\u043a\u043e\u043c\u0431\u0438\u043d\u0430\u043d\u0442\u043d\u043e\u0433\u043e \u0444\u0435\u0440\u043c\u0435\u043d\u0442\u043e\u0432.<\/p>\n<h2>\u041c\u0410\u0422\u0415\u0420\u0418\u0410\u041b\u042b \u0418 \u041c\u0415\u0422\u041e\u0414\u042b<\/h2>\n<p>\u0412 \u0440\u0430\u0431\u043e\u0442\u0435 \u0438\u0441\u043f\u043e\u043b\u044c\u0437\u043e\u0432\u0430\u043b\u0438\u0441\u044c \u0440\u0435\u0430\u043a\u0442\u0438\u0432\u044b \u043f\u0440\u043e\u0438\u0437\u0432\u043e\u0434\u0441\u0442\u0432\u0430 \u201cSigma-Aldrich\u201d (\u0421\u0428\u0410), \u201cFisher\u201d (\u0421\u0428\u0410), \u201cPanreac\u201d (\u0418\u0441\u043f\u0430\u043d\u0438\u044f)\u00a0 \u0438 \u201c\u0425\u0435\u043b\u0438\u043a\u043e\u043d\u201d (\u0420\u043e\u0441\u0441\u0438\u044f). \u0414\u043b\u044f \u0445\u0440\u043e\u043c\u0430\u0442\u043e\u0433\u0440\u0430\u0444\u0438\u0447\u0435\u0441\u043a\u043e\u0439 \u043e\u0447\u0438\u0441\u0442\u043a\u0438 \u0444\u0435\u0440\u043c\u0435\u043d\u0442\u0430 \u043f\u0440\u0438\u043c\u0435\u043d\u044f\u043b\u0438\u0441\u044c \u0441\u043b\u0435\u0434\u0443\u044e\u0449\u0438\u0435 \u043d\u043e\u0441\u0438\u0442\u0435\u043b\u0438: \u0444\u043e\u0441\u0444\u043e\u0446\u0435\u043b\u043b\u044e\u043b\u043e\u0437\u0430 \u0420-11 (&#171;Whatman&#187;, \u0410\u043d\u0433\u043b\u0438\u044f), \u0433\u0435\u043f\u0430\u0440\u0438\u043d-\u0441\u0435\u0444\u0430\u0440\u043e\u0437\u0430 (&#171;Bio-Rad&#187;, \u0421\u0428\u0410), \u0433\u0438\u0434\u0440\u043e\u043a\u0441\u0438\u0430\u043f\u0430\u0442\u0438\u0442 (\u201cBioRad\u201d, \u0421\u0428\u0410). \u041d\u0430\u0440\u0430\u0431\u043e\u0442\u043a\u0430 \u0431\u0438\u043e\u043c\u0430\u0441\u0441\u044b \u0448\u0442\u0430\u043c\u043c\u0430-\u043f\u0440\u043e\u0434\u0443\u0446\u0435\u043d\u0442\u0430 \u043e\u0441\u0443\u0449\u0435\u0441\u0442\u0432\u043b\u044f\u043b\u0430\u0441\u044c c \u0438\u0441\u043f\u043e\u043b\u044c\u0437\u043e\u0432\u0430\u043d\u0438\u0435\u043c \u043a\u043e\u043c\u043f\u043e\u043d\u0435\u043d\u0442\u043e\u0432 \u043f\u0438\u0442\u0430\u0442\u0435\u043b\u044c\u043d\u043e\u0439 \u0441\u0440\u0435\u0434\u044b \u043f\u0440\u043e\u0438\u0437\u0432\u043e\u0434\u0441\u0442\u0432\u0430 \u201dOrganotechnie\u201d (\u0424\u0440\u0430\u043d\u0446\u0438\u044f).<\/p>\n<p>\u0428\u0442\u0430\u043c\u043c Esherichia coli ER2267 (F\u2019 proA+B+ lacIq \u0394(lacZ)M15 zzf::mini-Tn10 (Kanr)\/\u0394(argF-lacZ)U169 glnV44 e14- (McrA-) rfbD1. recA1 relA1. endA1 spoT1. Thi-1 \u0394(mcrC-mrr) 114::IS10) \u043f\u043e\u043b\u0443\u0447\u0435\u043d \u0438\u0437 \u201cNew England Biolabs, Inc.\u201d (\u0421\u0428\u0410). \u0414\u043b\u044f \u044d\u043a\u0441\u043f\u0435\u0440\u0438\u043c\u0435\u043d\u0442\u043e\u0432 \u0438\u0441\u043f\u043e\u043b\u044c\u0437\u043e\u0432\u0430\u043b\u0438 \u043f\u0440\u0435\u043f\u0430\u0440\u0430\u0442\u044b \u0414\u041d\u041a \u0444\u0430\u0433\u0430 \u03bb \u0438 \u0440\u0430\u0437\u043b\u0438\u0447\u043d\u044b\u0445 \u04215-\u043c\u0435\u0442\u0438\u043b\u0438\u0440\u043e\u0432\u0430\u043d\u043d\u044b\u0445 \u043f\u043b\u0430\u0437\u043c\u0438\u0434, \u043a\u043e\u0442\u043e\u0440\u044b\u0435 \u0431\u044b\u043b\u0438 \u0441\u043a\u043e\u043d\u0441\u0442\u0440\u0443\u0438\u0440\u043e\u0432\u0430\u043d\u044b \u0440\u0430\u043d\u0435\u0435 [7-9].<\/p>\n<p>\u0412 \u043a\u0430\u0447\u0435\u0441\u0442\u0432\u0435 \u043c\u0430\u0440\u043a\u0451\u0440\u0430 \u0434\u043b\u0438\u043d\u044b \u0444\u0440\u0430\u0433\u043c\u0435\u043d\u0442\u043e\u0432 \u0414\u041d\u041a \u043f\u0440\u0438 \u043f\u043e\u043b\u0443\u0447\u0435\u043d\u0438\u0438 \u044d\u043b\u0435\u043a\u0442\u0440\u043e\u0444\u043e\u0440\u0435\u0433\u0440\u0430\u043c\u043c \u0432 \u0430\u0433\u0430\u0440\u043e\u0437\u043d\u044b\u0445 \u0433\u0435\u043b\u044f\u0445 \u0438\u0441\u043f\u043e\u043b\u044c\u0437\u043e\u0432\u0430\u043b\u0438 \u0414\u041d\u041a-\u043c\u0430\u0440\u043a\u0451\u0440\u044b 1 kb (\u00ab\u0421\u0438\u0431\u042d\u043d\u0437\u0438\u043c\u00bb, \u0420\u043e\u0441\u0441\u0438\u044f). \u0414\u043b\u044f \u0440\u0430\u0437\u0431\u0430\u0432\u043b\u0435\u043d\u0438\u044f \u043f\u0440\u0435\u043f\u0430\u0440\u0430\u0442\u0430 \u0440\u0435\u043a\u043e\u043c\u0431\u0438\u043d\u0430\u0442\u043d\u043e\u0433\u043e GlaI \u0438\u0441\u043f\u043e\u043b\u044c\u0437\u043e\u0432\u0430\u043b\u0441\u044f SE-\u0431\u0443\u0444\u0435\u0440 \u0434\u043b\u044f \u0445\u0440\u0430\u043d\u0435\u043d\u0438\u044f \u0438 \u0440\u0430\u0437\u0431\u0430\u0432\u043b\u0435\u043d\u0438\u044f \u0444\u0435\u0440\u043c\u0435\u043d\u0442\u043e\u0432 \u00abB100\u00bb (10 \u043c\u041c \u0422\u0440\u0438\u0441-HCl (pH 7.6), 50 \u043c\u041c KCl, 0.1 \u043c\u041c \u042d\u0414\u0422\u0410, 200 \u043c\u043a\u0433\/\u043c\u043b BSA, 1 \u043c\u041c \u0414\u0422\u0422, 50% \u0433\u043b\u0438\u0446\u0435\u0440\u0438\u043d) (\u00ab\u0421\u0438\u0431\u042d\u043d\u0437\u0438\u043c\u00bb, \u0420\u043e\u0441\u0441\u0438\u044f). \u0412\u0441\u0435 \u044d\u043a\u0441\u043f\u0435\u0440\u0438\u043c\u0435\u0442\u044b \u043f\u043e \u0430\u043d\u0430\u043b\u0438\u0437\u0443 \u0430\u043a\u0442\u0438\u0432\u043d\u043e\u0441\u0442\u0438 \u0438 \u0441\u0443\u0431\u0441\u0442\u0440\u0430\u0442\u043d\u043e\u0439 \u0441\u043f\u0435\u0446\u0438\u0444\u0438\u0447\u043d\u043e\u0441\u0442\u0438 \u0440\u0435\u043a\u043e\u043c\u0431\u0438\u043d\u0430\u043d\u0442\u043d\u043e\u0433\u043e \u0438 \u043d\u0430\u0442\u0438\u0432\u043d\u043e\u0433\u043e GlaI \u043f\u0440\u043e\u0432\u043e\u0434\u0438\u043b\u0438\u0441\u044c \u0432 20 \u043c\u043a\u043b \u0440\u0435\u0430\u043a\u0446\u0438\u043e\u043d\u043d\u043e\u0439 \u0441\u043c\u0435\u0441\u0438, \u0441\u043e\u0434\u0435\u0440\u0436\u0430\u0449\u0435\u0439 SE-\u0431\u0443\u0444\u0435\u0440 \u00abY\u00bb (33 \u043c\u041c \u0422\u0440\u0438\u0441-\u0430\u0446\u0435\u0442\u0430\u0442 (pH 7.9), 10 \u043c\u041c \u043c\u0430\u0433\u043d\u0438\u044f \u0430\u0446\u0435\u0442\u0430\u0442, 66 \u043c\u041c \u043a\u0430\u043b\u0438\u044f \u0430\u0446\u0435\u0442\u0430\u0442, 1 \u043c\u041c \u0414\u0422\u0422) \u0438 0,5 \u043c\u043a\u0433 \u0441\u0443\u0431\u0441\u0442\u0440\u0430\u0442\u043d\u043e\u0439 \u0414\u041d\u041a \u043f\u0440\u0438 \u043e\u043f\u0442\u0438\u043c\u0430\u043b\u044c\u043d\u043e\u0439 \u0442\u0435\u043c\u043f\u0435\u0440\u0430\u0442\u0443\u0440\u0435 30\u00b0\u0421 \u0432 \u0442\u0435\u0447\u0435\u043d\u0438\u0435 1 \u0447\u0430\u0441\u0430.<\/p>\n<h3><em>\u041a\u043b\u043e\u043d\u0438\u0440\u043e\u0432\u0430\u043d\u0438\u0435 <\/em><em>GlaI<\/em><em>.<\/em><\/h3>\n<p>\u0411\u0430\u043a\u0442\u0435\u0440\u0438\u0430\u043b\u044c\u043d\u0430\u044f \u0414\u041d\u041a \u0448\u0442\u0430\u043c\u043c\u0430 <em>Glacial<\/em> <em>ice<\/em> <em>bacterium<\/em> \u0431\u044b\u043b\u0430 \u0432\u044b\u0434\u0435\u043b\u0435\u043d\u0430 \u043a\u0430\u043a \u043e\u043f\u0438\u0441\u0430\u043d\u043e \u0440\u0430\u043d\u0435\u0435 [10] \u0438 \u0433\u0438\u0434\u0440\u043e\u043b\u0438\u0437\u043e\u0432\u0430\u043b\u0430\u0441\u044c \u044d\u043d\u0434\u043e\u043d\u0443\u043a\u043b\u0435\u0430\u0437\u043e\u0439 \u0440\u0435\u0441\u0442\u0440\u0438\u043a\u0446\u0438\u0438 Kzo9I. \u0424\u0440\u0430\u0433\u043c\u0435\u043d\u0442\u044b \u0414\u041d\u041a \u043a\u043b\u043e\u043d\u0438\u0440\u043e\u0432\u0430\u043b\u0438\u0441\u044c \u0432 \u0432\u0435\u043a\u0442\u043e\u0440 pUC19 [11], \u043b\u0438\u043d\u0435\u0430\u0440\u0438\u0437\u043e\u0432\u0430\u043d\u043d\u044b\u0439 BamHI, \u0438 \u0434\u0430\u043b\u0435\u0435 \u043f\u043e \u0441\u0442\u0430\u043d\u0434\u0430\u0440\u0442\u043d\u043e\u0439 \u043c\u0435\u0442\u043e\u0434\u0438\u043a\u0435 [12] \u0431\u044b\u043b\u0430 \u043f\u043e\u043b\u0443\u0447\u0435\u043d\u0430 \u0431\u0438\u0431\u043b\u0438\u043e\u0442\u0435\u043a\u0430 \u0440\u0435\u043a\u043e\u043c\u0431\u0438\u043d\u0430\u043d\u0442\u043d\u044b\u0445 \u043a\u043b\u043e\u043d\u043e\u0432 <em>E<\/em><em>.<\/em><em>coli<\/em> ER2267, \u043d\u0435\u0441\u0443\u0449\u0438\u0445 \u043f\u043b\u0430\u0437\u043c\u0438\u0434\u044b \u0441\u043e \u0432\u0441\u0442\u0440\u043e\u0435\u043d\u043d\u044b\u043c\u0438 \u0444\u0440\u0430\u0433\u043c\u0435\u043d\u0442\u0430\u043c\u0438 \u0414\u041d\u041a <em>Glacial<\/em> <em>ice<\/em> <em>bacterium<\/em>. \u041f\u043e\u043b\u0443\u0447\u0435\u043d\u043d\u044b\u0435 \u043a\u043b\u043e\u043d\u044b \u0430\u043d\u0430\u043b\u0438\u0437\u0438\u0440\u043e\u0432\u0430\u043b\u0438\u0441\u044c \u043d\u0430 \u043f\u0440\u0435\u0434\u043c\u0435\u0442 \u043d\u0430\u043b\u0438\u0447\u0438\u044f \u0430\u043a\u0442\u0438\u0432\u043d\u043e\u0441\u0442\u0438 GlaI \u0432 \u043b\u0438\u0437\u0430\u0442\u0435 \u0441 \u0438\u0441\u043f\u043e\u043b\u044c\u0437\u043e\u0432\u0430\u043d\u0438\u0435\u043c \u0432 \u043a\u0430\u0447\u0435\u0441\u0442\u0432\u0435 \u0441\u0443\u0431\u0441\u0442\u0440\u0430\u0442\u0430 \u0414\u041d\u041a \u043f\u043b\u0430\u0437\u043c\u0438\u0434\u044b pHspAI [9], \u0433\u0438\u0434\u0440\u043e\u043b\u0438\u0437\u043e\u0432\u0430\u043d\u043d\u043e\u0439 \u0440\u0435\u0441\u0442\u0440\u0438\u043a\u0442\u0430\u0437\u043e\u0439 DriI (pHspAI\/DriI), \u043a\u0430\u043a \u043e\u043f\u0438\u0441\u0430\u043d\u043e \u0440\u0430\u043d\u0435\u0435 [13].<\/p>\n<h3><em>\u041d\u0430\u0440\u0430\u0431\u043e\u0442\u043a\u0430 \u0431\u0438\u043e\u043c\u0430\u0441\u0441\u044b \u0440\u0435\u043a\u043e\u043c\u0431\u0438\u043d\u0430\u043d\u0442\u043d\u043e\u0433\u043e \u0448\u0442\u0430\u043c\u043c\u0430 <\/em><em>E<\/em><em>.<\/em><em>coli<\/em> <em>ER<\/em><em>2267 (<\/em><em>pMTL<\/em><em>22-<\/em><em>GlaI<\/em><em>), \u043d\u0435\u0441\u0443\u0449\u0435\u0433\u043e \u043f\u043b\u0430\u0437\u043c\u0438\u0434\u0443 \u0441 \u0433\u0435\u043d\u043e\u043c <\/em><em>MD<\/em><em>-\u044d\u043d\u0434\u043e\u043d\u0443\u043a\u043b\u0435\u0430\u0437\u044b <\/em><em>GlaI<\/em><em>. <\/em><\/h3>\n<p>\u0414\u043b\u044f \u043f\u043e\u043b\u0443\u0447\u0435\u043d\u0438\u044f \u0431\u0438\u043e\u043c\u0430\u0441\u0441\u044b \u043e\u0434\u0438\u043d\u043e\u0447\u043d\u0443\u044e \u043a\u043e\u043b\u043e\u043d\u0438\u044e \u0448\u0442\u0430\u043c\u043c\u0430 <em>E<\/em><em>.<\/em><em>coli<\/em> ER2267 (pMTL22-GlaI) \u0437\u0430\u0441\u0435\u0432\u0430\u043b\u0438 \u0432\u043e \u0444\u043b\u0430\u043a\u043e\u043d \u0441\u043e 100 \u043c\u043b \u043f\u0438\u0442\u0430\u0442\u0435\u043b\u044c\u043d\u043e\u0439 \u0441\u0440\u0435\u0434\u044b LB (1% \u0442\u0440\u0438\u043f\u0442\u043e\u043d, 0.5% \u0434\u0440\u043e\u0436\u0436\u0435\u0432\u043e\u0439 \u044d\u043a\u0441\u0442\u0440\u0430\u043a\u0442, 0.5% NaCl, \u0440\u041d 7.5) \u0441 \u0430\u043c\u043f\u0438\u0446\u0438\u043b\u043b\u0438\u043d\u043e\u043c (50 \u043c\u043a\u0433\/\u043c\u043b). \u041a\u0443\u043b\u044c\u0442\u0443\u0440\u0443 \u043f\u043e\u0434\u0440\u0430\u0449\u0438\u0432\u0430\u043b\u0438 \u0432 \u0442\u0435\u0447\u0435\u043d\u0438\u0435 \u043d\u043e\u0447\u0438 \u0432 \u0442\u0435\u0440\u043c\u043e\u0441\u0442\u0430\u0442\u0435 \u043f\u0440\u0438 37\u00b0\u0421. \u0417\u0430\u0442\u0435\u043c \u043f\u043e\u043b\u0443\u0447\u0435\u043d\u043d\u044b\u0439 \u0438\u043d\u043e\u043a\u0443\u043b\u044f\u0442 \u0437\u0430\u0441\u0435\u0432\u0430\u043b\u0438 \u043f\u043e 5 \u043c\u043b \u0432 12 \u0444\u043b\u0430\u043a\u043e\u043d\u043e\u0432 \u0441\u043e 100 \u043c\u043b \u0441\u0440\u0435\u0434\u044b LB \u0441 \u0430\u043c\u043f\u0438\u0446\u0438\u043b\u043b\u0438\u043d\u043e\u043c. \u041a\u0443\u043b\u044c\u0442\u0443\u0440\u0443 \u043f\u043e\u0434\u0440\u0430\u0449\u0438\u0432\u0430\u043b\u0438 \u0432 \u0442\u0435\u0447\u0435\u043d\u0438\u0435 16 \u0447\u0430\u0441\u043e\u0432 \u0432 \u0442\u0435\u0440\u043c\u043e\u0441\u0442\u0430\u0442\u0438\u0440\u043e\u0432\u0430\u043d\u043d\u043e\u0439 \u043a\u0430\u0447\u0430\u043b\u043a\u0435 \u043f\u0440\u0438 30\u00b0\u0421 \u0441 \u043f\u0435\u0440\u0435\u043c\u0435\u0448\u0438\u0432\u0430\u043d\u0438\u0435\u043c \u043f\u0440\u0438 140 \u043e\u0431\/\u043c\u0438\u043d. \u00a0\u041f\u043e\u0441\u043b\u0435 11 \u0447\u0430\u0441\u043e\u0432 \u0432\u044b\u0440\u0430\u0449\u0438\u0432\u0430\u043d\u0438\u044f \u0432 \u043a\u0443\u043b\u044c\u0442\u0443\u0440\u0443 \u0434\u043e\u0431\u0430\u0432\u043b\u044f\u043b\u0438 IPTG \u0434\u043e \u043a\u043e\u043d\u0446\u0435\u043d\u0442\u0440\u0430\u0446\u0438\u0438 1 \u043c\u041c \u0438 \u0440\u0430\u0441\u0442\u0438\u043b\u0438 \u0435\u0449\u0435 \u0432 \u0442\u0435\u0447\u0435\u043d\u0438\u0435 5 \u0447\u0430\u0441\u043e\u0432. \u0417\u0430\u0442\u0435\u043c 1 \u043c\u043b \u043a\u0443\u043b\u044c\u0442\u0443\u0440\u0430\u043b\u044c\u043d\u043e\u0439 \u0436\u0438\u0434\u043a\u043e\u0441\u0442\u0438 \u043e\u0442\u0431\u0438\u0440\u0430\u043b\u0441\u044f \u0434\u043b\u044f \u0430\u043d\u0430\u043b\u0438\u0437\u0430, \u0430 \u043e\u0441\u0442\u0430\u043b\u044c\u043d\u0430\u044f \u043a\u0443\u043b\u044c\u0442\u0443\u0440\u0430 \u0446\u0435\u043d\u0442\u0440\u0438\u0444\u0443\u0433\u0438\u0440\u043e\u0432\u0430\u043b\u0430\u0441\u044c (J2-21 \u00abBeckman\u00bb, \u0421\u0428\u0410) \u043f\u0440\u0438 6000 \u043e\u0431\/\u043c\u0438\u043d \u0432 \u0442\u0435\u0447\u0435\u043d\u0438\u0435 30 \u043c\u0438\u043d. \u041e\u0441\u0430\u0434\u043e\u043a \u043a\u043b\u0435\u0442\u043e\u043a \u0437\u0430\u043c\u043e\u0440\u0430\u0436\u0438\u0432\u0430\u043b\u0438 \u043f\u0440\u0438 -20\u00b0\u0421.<\/p>\n<p>\u0414\u043b\u044f \u0430\u043d\u0430\u043b\u0438\u0437\u0430 \u0446\u0435\u043b\u0435\u0432\u043e\u0439 \u0430\u043a\u0442\u0438\u0432\u043d\u043e\u0441\u0442\u0438 1 \u043c\u043b \u043a\u0443\u043b\u044c\u0442\u0443\u0440\u0430\u043b\u044c\u043d\u043e\u0439 \u0436\u0438\u0434\u043a\u043e\u0441\u0442\u0438 \u043e\u0442\u043a\u0440\u0443\u0447\u0438\u0432\u0430\u043b\u0438 \u043d\u0430 \u0446\u0435\u043d\u0442\u0440\u0438\u0444\u0443\u0433\u0435 Eppendorf \u043f\u0440\u0438 13000 \u043e\u0431\/\u043c\u0438\u043d \u0432 \u0442\u0435\u0447\u0435\u043d\u0438\u0435 2 \u043c\u0438\u043d, \u0438 \u043f\u043e\u043b\u0443\u0447\u0435\u043d\u043d\u044b\u0439 \u043e\u0441\u0430\u0434\u043e\u043a \u043a\u043b\u0435\u0442\u043e\u043a \u0441\u0443\u0441\u043f\u0435\u043d\u0434\u0438\u0440\u043e\u0432\u0430\u043b\u0438 \u0432 100 \u043c\u043a\u043b \u043b\u0438\u0437\u0438\u0440\u0443\u044e\u0449\u0435\u0433\u043e \u0431\u0443\u0444\u0435\u0440\u0430 (10 \u043c\u041c \u0422\u0440\u0438\u0441-HCl, pH 8.5; 0.1 \u043c\u0433\/\u043c\u043b \u043b\u0438\u0437\u043e\u0446\u0438\u043c\u0430, 50 \u043c\u041c NaCl, 1 \u043c\u041c \u042d\u0414\u0422\u0410, 0,1% \u0422\u0440\u0438\u0442\u043e\u043d \u0425-100) \u0438 \u0432\u0441\u0442\u0440\u044f\u0445\u0438\u0432\u0430\u043b\u0438 \u0432 \u0442\u0435\u0447\u0435\u043d\u0438\u0435 30 \u043c\u0438\u043d \u043d\u0430 \u00abMulti-vortex V-32\u00bb (\u00abBiosan\u00bb, \u041b\u0438\u0442\u0432\u0430). 8 \u043c\u043a\u043b \u043f\u043e\u043b\u0443\u0447\u0435\u043d\u043d\u043e\u0433\u043e \u043b\u0438\u0437\u0430\u0442\u0430 \u043a\u043b\u0435\u0442\u043e\u0447\u043d\u043e\u0439 \u043a\u0443\u043b\u044c\u0442\u0443\u0440\u044b \u0434\u043e\u0431\u0430\u0432\u043b\u044f\u043b\u0438 \u043a 40 \u043c\u043a\u043b \u0440\u0435\u0430\u043a\u0446\u0438\u043e\u043d\u043d\u043e\u0439 \u0441\u043c\u0435\u0441\u0438, \u0441\u043e\u0434\u0435\u0440\u0436\u0430\u0449\u0435\u0439 1\u0445 SE-\u0431\u0443\u0444\u0435\u0440 \u00abY\u00bb \u0438 0,5 \u043c\u043a\u0433 \u0414\u041d\u041a \u043f\u043b\u0430\u0437\u043c\u0438\u0434\u044b p\u041dspAI\/DriI, \u0438\u0441\u043f\u043e\u043b\u044c\u0437\u043e\u0432\u0430\u043d\u043d\u043e\u0439 \u0440\u0430\u043d\u0435\u0435 \u0434\u043b\u044f \u0442\u0435\u0441\u0442\u0438\u0440\u043e\u0432\u0430\u043d\u0438\u044f GlaI \u0438\u0437 \u0434\u0438\u043a\u043e\u0433\u043e \u0448\u0442\u0430\u043c\u043c\u0430 [9]. \u0421\u043c\u0435\u0441\u044c \u043f\u0438\u043f\u0435\u0442\u0438\u0440\u043e\u0432\u0430\u043b\u0438, \u043f\u043e\u0441\u043b\u0435 \u0447\u0435\u0433\u043e 20 \u043c\u043a\u043b \u044d\u0442\u043e\u0439 \u0441\u043c\u0435\u0441\u0438 \u043f\u0435\u0440\u0435\u043d\u043e\u0441\u0438\u043b\u0438 \u0432 \u0441\u043b\u0435\u0434\u0443\u044e\u0449\u0443\u044e \u043b\u0443\u043d\u043a\u0443 \u0441 20 \u043c\u043a\u043b \u0442\u043e\u0439 \u0436\u0435 \u0440\u0435\u0430\u043a\u0446\u0438\u043e\u043d\u043d\u043e\u0439 \u0441\u043c\u0435\u0441\u0438, \u0432 \u0440\u0435\u0437\u0443\u043b\u044c\u0442\u0430\u0442\u0435 \u0447\u0435\u0433\u043e \u043f\u043e\u043b\u0443\u0447\u0430\u043b\u0438 \u0440\u0435\u0430\u043a\u0446\u0438\u043e\u043d\u043d\u0443\u044e \u0441\u043c\u0435\u0441\u044c, \u0441\u043e\u0434\u0435\u0440\u0436\u0430\u0449\u0443\u044e \u0432 2 \u0440\u0430\u0437\u0430 \u043c\u0435\u043d\u044c\u0448\u0435 \u043b\u0438\u0437\u0430\u0442\u0430. \u0410\u043d\u0430\u043b\u043e\u0433\u0438\u0447\u043d\u043e\u0439 \u043f\u0440\u043e\u0446\u0435\u0434\u0443\u0440\u043e\u0439 \u043f\u043e\u043b\u0443\u0447\u0430\u043b\u0438 \u0432\u0441\u0435\u0433\u043e 8 \u043f\u043e\u0441\u043b\u0435\u0434\u043e\u0432\u0430\u0442\u0435\u043b\u044c\u043d\u044b\u0445 \u0440\u0430\u0437\u0432\u0435\u0434\u0435\u043d\u0438\u0439 \u043b\u0438\u0437\u0430\u0442\u0430 \u0432 \u0440\u0435\u0430\u043a\u0446\u0438\u043e\u043d\u043d\u043e\u0439 \u0441\u043c\u0435\u0441\u0438 \u0441 SE-\u0431\u0443\u0444\u0435\u0440\u043e\u043c \u00abY\u00bb \u0438 \u0414\u041d\u041a p\u041dspAI\/DriI. \u0421\u043c\u0435\u0441\u044c \u0438\u043d\u043a\u0443\u0431\u0438\u0440\u043e\u0432\u0430\u043b\u0438 \u0432 \u0442\u0435\u0447\u0435\u043d\u0438\u0435 1 \u0447\u0430\u0441\u0430 \u043f\u0440\u0438 \u0442\u0435\u043c\u043f\u0435\u0440\u0430\u0442\u0443\u0440\u0435 30\u00b0\u0421, \u043f\u043e\u0441\u043b\u0435 \u0447\u0435\u0433\u043e \u0440\u0435\u0430\u043a\u0446\u0438\u044e \u043e\u0441\u0442\u0430\u043d\u0430\u0432\u043b\u0438\u0432\u0430\u043b\u0438 \u0441\u0442\u043e\u043f-\u0431\u0443\u0444\u0435\u0440\u043e\u043c (40% \u0441\u0430\u0445\u0430\u0440\u043e\u0437\u0430, 0.1 \u041c \u042d\u0414\u0422\u0410, 0.05% \u0431\u0440\u043e\u043c\u0444\u0435\u043d\u043e\u043b\u043e\u0432\u044b\u0439 \u0441\u0438\u043d\u0438\u0439).<\/p>\n<h3><em>\u0412\u044b\u0434\u0435\u043b\u0435\u043d\u0438\u0435 \u043f\u0440\u0435\u043f\u0430\u0440\u0430\u0442\u0430 \u0444\u0435\u0440\u043c\u0435\u043d\u0442\u0430 <\/em><em>GlaI<\/em><em> \u0438\u0437 \u0431\u0438\u043e\u043c\u0430\u0441\u0441\u044b. <\/em><\/h3>\n<p>\u0412\u044b\u0434\u0435\u043b\u0435\u043d\u0438\u0435 \u0444\u0435\u0440\u043c\u0435\u043d\u0442\u0430 \u043f\u0440\u043e\u0432\u043e\u0434\u0438\u043b\u0438 \u043f\u0440\u0438 4\u00b0C \u043f\u0443\u0442\u0435\u043c \u043a\u043e\u043b\u043e\u043d\u043e\u0447\u043d\u043e\u0439 \u0445\u0440\u043e\u043c\u0430\u0442\u043e\u0433\u0440\u0430\u0444\u0438\u0438. 10 \u0433 \u0431\u0438\u043e\u043c\u0430\u0441\u0441\u044b \u0448\u0442\u0430\u043c\u043c\u0430 <em>E<\/em><em>.<\/em><em>coli<\/em> ER2267 (pMTL22-GlaI) \u0441\u0443\u0441\u043f\u0435\u043d\u0434\u0438\u0440\u043e\u0432\u0430\u043b\u0438 \u0432 30 \u043c\u043b \u0431\u0443\u0444\u0435\u0440\u0430 \u0410 (10 \u043c\u041c Tris-HCl, pH 7.5, 0.1 \u043c\u041c \u042d\u0414\u0422\u0410, 7 \u043c\u041c \u03b2-\u043c\u0435\u0440\u043a\u0430\u043f\u0442\u043e\u044d\u0442\u0430\u043d\u043e\u043b), \u0441\u043e\u0434\u0435\u0440\u0436\u0430\u0449\u0435\u0433\u043e 0.3 \u041c NaCl, 0.1 \u043c\u0433\/\u043c\u043b \u043b\u0438\u0437\u043e\u0446\u0438\u043c, 1 \u043c\u041c \u0444\u0435\u043d\u0438\u043b\u043c\u0435\u0442\u0438\u043b\u0441\u0443\u043b\u044c\u0444\u043e\u043d\u0438\u043b\u0444\u0442\u043e\u0440\u0438\u0434 (PMSF) \u0438 0.1% \u0422\u0440\u0438\u0442\u043e\u043d X-100. \u0411\u0438\u043e\u043c\u0430\u0441\u0441\u0443 \u043b\u0438\u0437\u0438\u0440\u043e\u0432\u0430\u043b\u0438 \u0432 \u0441\u0442\u0435\u043a\u043b\u044f\u043d\u043d\u043e\u043c \u0441\u0442\u0430\u043a\u0430\u043d\u0435 \u043f\u0440\u0438 \u043f\u0435\u0440\u0435\u043c\u0435\u0448\u0438\u0432\u0430\u043d\u0438\u0438 \u043d\u0430 \u043c\u0430\u0433\u043d\u0438\u0442\u043d\u043e\u0439 \u043c\u0435\u0448\u0430\u043b\u043a\u0435 \u0432 \u0442\u0435\u0447\u0435\u043d\u0438\u0435 1 \u0447\u0430\u0441\u0430. \u041f\u043e\u043b\u0443\u0447\u0435\u043d\u043d\u044b\u0439 \u043b\u0438\u0437\u0430\u0442 \u043a\u043b\u0435\u0442\u043e\u043a \u043e\u0431\u0440\u0430\u0431\u0430\u0442\u044b\u0432\u0430\u043b\u0438 \u0443\u043b\u044c\u0442\u0440\u0430\u0437\u0432\u0443\u043a\u043e\u043c \u043d\u0430 \u0434\u0435\u0437\u0438\u043d\u0442\u0435\u0433\u0440\u0430\u0442\u043e\u0440\u0435 Soniprep 150 (\u00abMSE\u00bb, \u0410\u043d\u0433\u043b\u0438\u044f) \u0441 \u0434\u0438\u0430\u043c\u0435\u0442\u0440\u043e\u043c \u0430\u0434\u0430\u043f\u0442\u0435\u0440\u0430 2 \u0441\u043c.\u00a0 \u0414\u0435\u0437\u0438\u043d\u0442\u0435\u0433\u0440\u0430\u0446\u0438\u044e \u0443\u043b\u044c\u0442\u0440\u0430\u0437\u0432\u0443\u043a\u043e\u043c \u043f\u0440\u043e\u0432\u043e\u0434\u0438\u043b\u0438 \u043f\u0440\u0438 \u0430\u043c\u043f\u043b\u0438\u0442\u0443\u0434\u0435 20 \u043c\u043a\u043c 5 \u0440\u0430\u0437 \u043f\u043e 30 \u0441\u0435\u043a\u0443\u043d\u0434 \u0441 \u0438\u043d\u0442\u0435\u0440\u0432\u0430\u043b\u0430\u043c\u0438 \u0432 1 \u043c\u0438\u043d \u0441 \u043e\u0445\u043b\u0430\u0436\u0434\u0435\u043d\u0438\u0435\u043c \u0441\u0443\u0441\u043f\u0435\u043d\u0437\u0438\u0438 \u0432 \u043b\u0435\u0434\u044f\u043d\u043e\u0439 \u0431\u0430\u043d\u0435.<\/p>\n<p>\u0414\u0430\u043b\u0435\u0435 \u043b\u0438\u0437\u0430\u0442 \u043e\u0441\u0432\u0435\u0442\u043b\u044f\u043b\u0438 \u0446\u0435\u043d\u0442\u0440\u0438\u0444\u0443\u0433\u0438\u0440\u043e\u0432\u0430\u043d\u0438\u0435\u043c \u043d\u0430 \u0446\u0435\u043d\u0442\u0440\u0438\u0444\u0443\u0433\u0435 J2-21 (\u00abBeckman\u00bb, \u0421\u0428\u0410) \u043f\u0440\u0438 15000 \u043e\u0431\/\u043c\u0438\u043d \u0432 \u0442\u0435\u0447\u0435\u043d\u0438\u0435 30 \u043c\u0438\u043d. \u041f\u043e\u0441\u043b\u0435 \u0447\u0435\u0433\u043e \u0441\u0443\u043f\u0435\u0440\u043d\u0430\u0442\u0430\u043d\u0442 \u043d\u0430\u043d\u043e\u0441\u0438\u043b\u0438 \u043d\u0430 \u043a\u043e\u043b\u043e\u043d\u043a\u0443 \u0441 \u0444\u043e\u0441\u0444\u043e\u0446\u0435\u043b\u043b\u044e\u043b\u043e\u0437\u043e\u0439 \u0420-11 \u043e\u0431\u044a\u0451\u043c\u043e\u043c 20 \u043c\u043b, \u043f\u0440\u0435\u0434\u0432\u0430\u0440\u0438\u0442\u0435\u043b\u044c\u043d\u043e \u0443\u0440\u0430\u0432\u043d\u043e\u0432\u0435\u0448\u0435\u043d\u043d\u0443\u044e \u0431\u0443\u0444\u0435\u0440\u043e\u043c \u0410, \u0441\u043e\u0434\u0435\u0440\u0436\u0430\u0449\u0438\u043c 0.1 \u041c NaCl. \u041a\u043e\u043b\u043e\u043d\u043a\u0443 \u043f\u0440\u043e\u043c\u044b\u0432\u0430\u043b\u0438 40 \u043c\u043b \u0431\u0443\u0444\u0435\u0440\u0430 \u0410 \u0441 0.1 \u041c NaCl, \u0437\u0430\u0442\u0435\u043c \u043f\u0440\u043e\u0432\u043e\u0434\u0438\u043b\u0438 \u044d\u043b\u044e\u0446\u0438\u044e \u0446\u0435\u043b\u0435\u0432\u043e\u0433\u043e \u0431\u0435\u043b\u043a\u0430 \u043b\u0438\u043d\u0435\u0439\u043d\u044b\u043c \u0433\u0440\u0430\u0434\u0438\u0435\u043d\u0442\u043e\u043c NaCl (0.1-0.65 \u041c) \u0432 \u0431\u0443\u0444\u0435\u0440\u0435 \u0410 \u043e\u0431\u044a\u0451\u043c\u043e\u043c 200 \u043c\u043b, \u0441\u043e\u0431\u0438\u0440\u0430\u044f \u0444\u0440\u0430\u043a\u0446\u0438\u0438 \u043f\u043e 4 \u043c\u043b. \u0424\u0440\u0430\u043a\u0446\u0438\u0438, \u0441\u043e\u0434\u0435\u0440\u0436\u0430\u0449\u0438\u0435 MD-\u044d\u043d\u0434\u043e\u043d\u0443\u043a\u043b\u0435\u0430\u0437\u0443, \u043e\u0431\u044a\u0435\u0434\u0438\u043d\u044f\u043b\u0438, \u0434\u0438\u0430\u043b\u0438\u0437\u043e\u0432\u0430\u043b\u0438 \u043f\u0440\u043e\u0442\u0438\u0432 20 \u043e\u0431\u044a\u0451\u043c\u043e\u0432 \u0431\u0443\u0444\u0435\u0440\u0430 \u0410 \u0441 0.1 \u041c NaCl \u0438 \u043d\u0430\u043d\u043e\u0441\u0438\u043b\u0438 \u043d\u0430 \u043a\u043e\u043b\u043e\u043d\u043a\u0443 \u0441 10 \u043c\u043b \u0433\u0435\u043f\u0430\u0440\u0438\u043d-\u0441\u0435\u0444\u0430\u0440\u043e\u0437\u044b. \u042d\u043b\u044e\u0446\u0438\u044e \u0444\u0435\u0440\u043c\u0435\u043d\u0442\u0430 \u043f\u0440\u043e\u0432\u043e\u0434\u0438\u043b\u0438 \u043b\u0438\u043d\u0435\u0439\u043d\u044b\u043c \u0433\u0440\u0430\u0434\u0438\u0435\u043d\u0442\u043e\u043c NaCl (0.1-0.45 \u041c) \u0432 \u0431\u0443\u0444\u0435\u0440\u0435 \u0410 \u043e\u0431\u044a\u0451\u043c\u043e\u043c 200 \u043c\u043b, \u0441\u043e\u0431\u0438\u0440\u0430\u044f \u0444\u0440\u0430\u043a\u0446\u0438\u0438 \u043f\u043e 4 \u043c\u043b. \u0426\u0435\u043b\u0435\u0432\u044b\u0435 \u0444\u0440\u0430\u043a\u0446\u0438\u0438 \u043e\u0431\u044a\u0435\u0434\u0438\u043d\u044f\u043b\u0438 \u0438 \u043d\u0430\u043d\u043e\u0441\u0438\u043b\u0438 \u043d\u0430 \u043a\u043e\u043b\u043e\u043d\u043a\u0443 \u0441 \u0433\u0438\u0434\u0440\u043e\u043a\u0441\u0438\u0430\u043f\u0430\u0442\u0438\u0442\u043e\u043c \u043e\u0431\u044a\u0435\u043c\u043e\u043c 4 \u043c\u043b, \u043f\u0440\u0435\u0434\u0432\u0430\u0440\u0438\u0442\u0435\u043b\u044c\u043d\u043e \u043f\u0440\u043e\u043c\u044b\u0442\u0443\u044e \u0443\u0440\u0430\u0432\u043d\u043e\u0432\u0435\u0448\u0438\u0432\u0430\u044e\u0449\u0438\u043c \u0431\u0443\u0444\u0435\u0440\u043e\u043c \u0411 (10 \u043c\u041c K-\u0444\u043e\u0441\u0444\u0430\u0442, pH 7.2, 0.1 \u043cM \u042d\u0414\u0422\u0410, 7 \u043c\u041c \u03b2-\u043c\u0435\u0440\u043a\u0430\u043f\u0442\u043e\u044d\u0442\u0430\u043d\u043e\u043b, 0.05 M NaCl). \u041a\u043e\u043b\u043e\u043d\u043a\u0443 \u043f\u0440\u043e\u043c\u044b\u0432\u0430\u043b\u0438 10 \u043c\u043b \u0431\u0443\u0444\u0435\u0440\u0430 \u0411 \u0438 \u043f\u0440\u043e\u0432\u043e\u0434\u0438\u043b\u0438 \u044d\u043b\u044e\u0446\u0438\u044e \u0444\u0435\u0440\u043c\u0435\u043d\u0442\u0430 \u043b\u0438\u043d\u0435\u0439\u043d\u044b\u043c \u0433\u0440\u0430\u0434\u0438\u0435\u043d\u0442\u043e\u043c K-\u0444\u043e\u0441\u0444\u0430\u0442\u0430 (0.01-0.4 \u041c) \u0432 \u0431\u0443\u0444\u0435\u0440\u0435 \u0411 \u043e\u0431\u044a\u0435\u043c\u043e\u043c 100 \u043c\u043b, \u0441\u043e\u0431\u0438\u0440\u0430\u044f \u0444\u0440\u0430\u043a\u0446\u0438\u0438 \u043f\u043e 2.5 \u043c\u043b. \u0424\u0440\u0430\u043a\u0446\u0438\u0438, \u0441\u043e\u0434\u0435\u0440\u0436\u0430\u0449\u0438\u0435 \u0446\u0435\u043b\u0435\u0432\u043e\u0439 \u0431\u0435\u043b\u043e\u043a, \u043e\u0431\u044a\u0435\u0434\u0438\u043d\u044f\u043b\u0438 \u0438 \u0434\u0438\u0430\u043b\u0438\u0437\u043e\u0432\u0430\u043b\u0438 \u043f\u0440\u043e\u0442\u0438\u0432 20 \u043e\u0431\u044a\u0451\u043c\u043e\u0432 \u043a\u043e\u043d\u0446\u0435\u043d\u0442\u0440\u0438\u0440\u0443\u044e\u0449\u0435\u0433\u043e \u0431\u0443\u0444\u0435\u0440\u0430 (10 \u043c\u041c \u0422\u0440\u0438\u0441-HCl, pH 7.5, 0.1 \u041c NaCl, 0.1 \u043c\u041c \u042d\u0414\u0422\u0410, 0.05% \u0422\u0440\u0438\u0442\u043e\u043d \u0425-100, 7 \u043c\u041c \u03b2-\u043c\u0435\u0440\u043a\u0430\u043f\u0442\u043e\u044d\u0442\u0430\u043d\u043e\u043b, 50% \u0433\u043b\u0438\u0446\u0435\u0440\u0438\u043d). \u041f\u043e\u043b\u0443\u0447\u0435\u043d\u043d\u044b\u0439 \u043f\u0440\u0435\u043f\u0430\u0440\u0430\u0442 \u0444\u0435\u0440\u043c\u0435\u043d\u0442\u0430 GlaI \u0445\u0440\u0430\u043d\u0438\u043b\u0438 \u043f\u0440\u0438 -20\u00b0C.<\/p>\n<h2>\u0420\u0415\u0417\u0423\u041b\u042c\u0422\u0410\u0422\u042b \u0418 \u041e\u0411\u0421\u0423\u0416\u0414\u0415\u041d\u0418\u0415<\/h2>\n<p>\u041f\u043e \u0440\u0435\u0437\u0443\u043b\u044c\u0442\u0430\u0442\u0430\u043c \u043e\u043f\u0440\u0435\u0434\u0435\u043b\u0435\u043d\u0438\u044f \u0430\u043a\u0442\u0438\u0432\u043d\u043e\u0441\u0442\u0438 MD-\u044d\u043d\u0434\u043e\u043d\u0443\u043a\u043b\u0435\u0430\u0437\u044b GlaI \u0432 \u043b\u0438\u0437\u0430\u0442\u0430\u0445 \u043a\u043b\u043e\u043d\u043e\u0432 \u0431\u0438\u0431\u043b\u0438\u043e\u0442\u0435\u043a\u0438 pUC19\/BamHI-Gla DNA\/Kzo9I \u0441 \u0438\u0441\u043f\u043e\u043b\u044c\u0437\u043e\u0432\u0430\u043d\u0438\u0435\u043c \u0414\u041d\u041a-\u0441\u0443\u0431\u0441\u0442\u0440\u0430\u0442\u0430 pHspAI\/DriI \u0431\u044b\u043b \u0432\u044b\u0434\u0435\u043b\u0435\u043d \u0440\u0435\u043a\u043e\u043c\u0431\u0438\u043d\u0430\u043d\u0442\u043d\u044b\u0439 \u0448\u0442\u0430\u043c\u043c <em>E.coli<\/em>, \u043d\u0435\u0441\u0443\u0449\u0438\u0439 \u043f\u043b\u0430\u0437\u043c\u0438\u0434\u0443 \u0441 \u0446\u0435\u043b\u0435\u0432\u044b\u043c \u0433\u0435\u043d\u043e\u043c <em>glaI<\/em>, \u043a\u043e\u0442\u043e\u0440\u044b\u0439 \u0437\u0430\u0442\u0435\u043c \u0431\u044b\u043b \u043f\u0435\u0440\u0435\u043a\u043b\u043e\u043d\u0438\u0440\u043e\u0432\u0430\u043d \u0432 \u043f\u043b\u0430\u0437\u043c\u0438\u0434\u043d\u044b\u0439 \u0432\u0435\u043a\u0442\u043e\u0440 pMTL22 [14]\u00a0 \u043f\u043e \u0441\u0430\u0439\u0442\u0430\u043c \u0440\u0435\u0441\u0442\u0440\u0438\u043a\u0446\u0438\u0438 FauNDI \u0438 BamHI. \u0421\u043a\u043e\u043d\u0441\u0442\u0440\u0443\u0438\u0440\u043e\u0432\u0430\u043d\u043d\u043e\u0439 \u043f\u043b\u0430\u0437\u043c\u0438\u0434\u043e\u0439 pMTL22-GlaI \u0431\u044b\u043b\u0438 \u0442\u0440\u0430\u043d\u0441\u0444\u043e\u0440\u043c\u0438\u0440\u043e\u0432\u0430\u043d\u044b \u043a\u043b\u0435\u0442\u043a\u0438 <em>E<\/em><em>.<\/em><em>coli<\/em> ER2267 \u0438 \u043f\u043e\u043b\u0443\u0447\u0435\u043d \u0440\u0435\u043a\u043e\u043c\u0431\u0438\u043d\u0430\u043d\u0442\u043d\u044b\u0439 \u0448\u0442\u0430\u043c\u043c <em>E<\/em><em>.<\/em><em>coli<\/em> ER2267 (pMTL22-GlaI), \u043a\u043e\u0442\u043e\u0440\u044b\u0439 \u0434\u0430\u043b\u0435\u0435 \u0438\u0441\u043f\u043e\u043b\u044c\u0437\u043e\u0432\u0430\u043b\u0441\u044f \u0434\u043b\u044f \u043d\u0430\u0440\u0430\u0431\u043e\u0442\u043a\u0438 \u0431\u0438\u043e\u043c\u0430\u0441\u0441\u044b \u0438 \u043f\u043e\u0441\u043b\u0435\u0434\u0443\u044e\u0449\u0435\u0433\u043e \u0432\u044b\u0434\u0435\u043b\u0435\u043d\u0438\u044f \u0444\u0435\u0440\u043c\u0435\u043d\u0442\u0430. \u0420\u0435\u0437\u0443\u043b\u044c\u0442\u0430\u0442\u044b \u0442\u0435\u0441\u0442\u0438\u0440\u043e\u0432\u0430\u043d\u0438\u044f \u0446\u0435\u043b\u0435\u0432\u043e\u0439 \u0430\u043a\u0442\u0438\u0432\u043d\u043e\u0441\u0442\u0438 \u0432 \u043b\u0438\u0437\u0430\u0442\u0435 \u043a\u043b\u0435\u0442\u043e\u043a \u043f\u043e\u043b\u0443\u0447\u0435\u043d\u043d\u043e\u0439 \u0431\u0438\u043e\u043c\u0430\u0441\u0441\u044b \u0440\u0435\u043a\u043e\u043c\u0431\u0438\u043d\u0430\u043d\u0442\u043d\u043e\u0433\u043e \u0448\u0442\u0430\u043c\u043c\u0430 <em>E<\/em><em>.<\/em><em>coli<\/em> ER2267 (pMTL22-GlaI) \u043f\u0440\u0438\u0432\u0435\u0434\u0435\u043d\u044b \u043d\u0430 \u0440\u0438\u0441\u0443\u043d\u043a\u0435 1.[\/vc_column_text][vc_separator border_width=&#187;3&#8243;][vc_row_inner][vc_column_inner width=&#187;1\/2&#8243;][vc_single_image image=&#187;137&#8243; img_size=&#187;medium&#187; alignment=&#187;center&#187; onclick=&#187;link_image&#187;][\/vc_column_inner][vc_column_inner width=&#187;1\/2&#8243;][vc_column_text]\u0420\u0438\u0441\u0443\u043d\u043e\u043a 1. \u0410\u043d\u0430\u043b\u0438\u0437 \u0430\u043a\u0442\u0438\u0432\u043d\u043e\u0441\u0442\u0438 \u0446\u0435\u043b\u0435\u0432\u043e\u0433\u043e \u0444\u0435\u0440\u043c\u0435\u043d\u0442\u0430 \u0432 \u0431\u0438\u043e\u043c\u0430\u0441\u0441\u0435 \u0440\u0435\u043a\u043e\u043c\u0431\u0438\u043d\u0430\u043d\u0442\u043d\u043e\u0433\u043e \u0448\u0442\u0430\u043c\u043c\u0430 <em>E.coli<\/em> ER2267 (pMTL22-GlaI) \u2013 \u043f\u0440\u043e\u0434\u0443\u0446\u0435\u043d\u0442\u0430 GlaI, \u043d\u0430 \u0414\u041d\u041a \u043f\u043b\u0430\u0437\u043c\u0438\u0434\u044b pHspAI\/DriI. \u042d\u043b\u0435\u043a\u0442\u0440\u043e\u0444\u043e\u0440\u0435\u0437 \u0432 1% \u0430\u0433\u0430\u0440\u043e\u0437\u043d\u043e\u043c \u0433\u0435\u043b\u0435. \u0414\u043e\u0440\u043e\u0436\u043a\u0438: 1-8 \u2013 \u0434\u043e\u0431\u0430\u0432\u043b\u0435\u043d\u044b \u0440\u0430\u0437\u0432\u0435\u0434\u0435\u043d\u0438\u044f \u043b\u0438\u0437\u0430\u0442\u0430 \u00a0\u0431\u0438\u043e\u043c\u0430\u0441\u0441\u044b \u043a\u043b\u0435\u0442\u043e\u043a \u043a\u0430\u043a \u043e\u043f\u0438\u0441\u0430\u043d\u043e \u0432 \u00ab\u041c\u0430\u0442\u0435\u0440\u0438\u0430\u043b\u0430\u0445 \u0438 \u041c\u0435\u0442\u043e\u0434\u0430\u0445\u00bb; \u041c \u2013 \u0414\u041d\u041a-\u043c\u0430\u0440\u043a\u0451\u0440\u044b 1kb[\/vc_column_text][\/vc_column_inner][\/vc_row_inner][vc_separator border_width=&#187;3&#8243;][vc_column_text]\u041a\u0430\u043a \u0432\u0438\u0434\u043d\u043e \u0438\u0437 \u0440\u0438\u0441\u0443\u043d\u043a\u0430, \u043d\u0430 \u0434\u043e\u0440\u043e\u0436\u043a\u0435 1 \u043d\u0430\u0431\u043b\u044e\u0434\u0430\u0435\u0442\u0441\u044f \u043f\u043e\u043b\u043d\u044b\u0439 \u0433\u0438\u0434\u0440\u043e\u043b\u0438\u0437 \u0441\u0443\u0431\u0441\u0442\u0440\u0430\u0442\u043d\u043e\u0439 \u0414\u041d\u041a, \u0438 \u043a\u0430\u0440\u0442\u0438\u043d\u0430 \u0433\u0438\u0434\u0440\u043e\u043b\u0438\u0437\u0430 \u0441\u043e\u043e\u0442\u0432\u0435\u0442\u0441\u0442\u0432\u0443\u0435\u0442 \u043d\u0430\u0431\u043e\u0440\u0443 \u0444\u0440\u0430\u0433\u043c\u0435\u043d\u0442\u043e\u0432, \u0445\u0430\u0440\u0430\u043a\u0442\u0435\u0440\u043d\u043e\u043c\u0443 \u0434\u043b\u044f \u043d\u0430\u0442\u0438\u0432\u043d\u043e\u0433\u043e \u0444\u0435\u0440\u043c\u0435\u043d\u0442\u0430 GlaI [9].<\/p>\n<p>\u0412 \u0440\u0435\u0437\u0443\u043b\u044c\u0442\u0430\u0442\u0435 \u0432\u044b\u0434\u0435\u043b\u0435\u043d\u0438\u044f MD-\u044d\u043d\u0434\u043e\u043d\u0443\u043a\u043b\u0435\u0430\u0437\u044b GlaI \u043f\u0443\u0442\u0435\u043c \u0445\u0440\u043e\u043c\u0430\u0442\u043e\u0433\u0440\u0430\u0444\u0438\u0447\u0435\u0441\u043a\u043e\u0439 \u043e\u0447\u0438\u0441\u0442\u043a\u0438 \u0438\u0437 10 \u0433 \u043a\u043b\u0435\u0442\u043e\u043a \u0440\u0435\u043a\u043e\u043c\u0431\u0438\u043d\u0430\u043d\u0442\u043d\u043e\u0433\u043e \u0448\u0442\u0430\u043c\u043c\u0430-\u043f\u0440\u043e\u0434\u0443\u0446\u0435\u043d\u0442\u0430 \u0431\u044b\u043b\u043e \u043f\u043e\u043b\u0443\u0447\u0435\u043d\u043e 6 \u043c\u043b \u043f\u0440\u0435\u043f\u0430\u0440\u0430\u0442\u0430 \u0444\u0435\u0440\u043c\u0435\u043d\u0442\u0430 \u0441 \u0430\u043a\u0442\u0438\u0432\u043d\u043e\u0441\u0442\u044c\u044e 120,000 \u0435.\u0430.\/\u043c\u043b, \u0447\u0442\u043e \u0431\u043e\u043b\u0435\u0435 \u0447\u0435\u043c \u0432 10 \u0440\u0430\u0437 \u043f\u0440\u0435\u0432\u044b\u0448\u0430\u0435\u0442 \u0430\u043a\u0442\u0438\u0432\u043d\u043e\u0441\u0442\u044c \u043f\u0440\u0435\u043f\u0430\u0440\u0430\u0442\u043e\u0432, \u043f\u043e\u043b\u0443\u0447\u0430\u0435\u043c\u044b\u0445 \u0438\u0437 \u0434\u0438\u043a\u043e\u0433\u043e \u0448\u0442\u0430\u043c\u043c\u0430-\u043f\u0440\u043e\u0434\u0443\u0446\u0435\u043d\u0442\u0430 GlaI (\u0434\u043e 10,000 \u0435.\u0430.\/\u043c\u043b).<\/p>\n<h3><em>\u0410\u043d\u0430\u043b\u0438\u0437 \u0441\u0443\u0431\u0441\u0442\u0440\u0430\u0442\u043d\u043e\u0439 \u0441\u043f\u0435\u0446\u0438\u0444\u0438\u0447\u043d\u043e\u0441\u0442\u0438 \u0440\u0435\u043a\u043e\u043c\u0431\u0438\u043d\u0430\u043d\u0442\u043d\u043e\u0433\u043e GlaI.<\/em><\/h3>\n<p>\u0420\u0430\u043d\u0435\u0435 \u0431\u044b\u043b\u043e \u0443\u0441\u0442\u0430\u043d\u043e\u0432\u043b\u0435\u043d\u043e, \u0447\u0442\u043e GlaI, \u0432\u044b\u0434\u0435\u043b\u0435\u043d\u043d\u044b\u0439 \u0438\u0437 \u0434\u0438\u043a\u043e\u0433\u043e \u0448\u0442\u0430\u043c\u043c\u0430, \u0438\u043c\u0435\u0435\u0442 \u0432 20-30 \u0440\u0430\u0437 \u0431\u043e\u043b\u044c\u0448\u0443\u044e \u0430\u043a\u0442\u0438\u0432\u043d\u043e\u0441\u0442\u044c \u0432 \u043f\u0440\u0438\u0441\u0443\u0442\u0441\u0442\u0432\u0438\u0438 20% DMSO [15]. \u00a0\u041f\u043e\u044d\u0442\u043e\u043c\u0443 \u043d\u0430\u043c\u0438 \u0431\u044b\u043b\u043e \u043f\u0440\u043e\u0432\u0435\u0434\u0435\u043d\u043e \u0441\u0440\u0430\u0432\u043d\u0435\u043d\u0438\u0435 \u0441\u0443\u0431\u0441\u0442\u0440\u0430\u0442\u043d\u043e\u0439 \u0441\u043f\u0435\u0446\u0438\u0444\u0438\u0447\u043d\u043e\u0441\u0442\u0438 \u0440\u0435\u043a\u043e\u043c\u0431\u0438\u043d\u0430\u043d\u0442\u043d\u043e\u0433\u043e \u0438 \u043d\u0430\u0442\u0438\u0432\u043d\u043e\u0433\u043e GlaI \u043f\u0440\u0438 \u0433\u0438\u0434\u0440\u043e\u043b\u0438\u0437\u0435 \u0414\u041d\u041a pHspAI\/DriI \u0432 \u043f\u0440\u0438\u0441\u0443\u0442\u0441\u0442\u0432\u0438\u0438 \u0440\u0430\u0437\u043d\u044b\u0445 \u043a\u043e\u043d\u0446\u0435\u043d\u0442\u0440\u0430\u0446\u0438\u0439 DMSO. \u0420\u0435\u0430\u043a\u0446\u0438\u0438 \u0433\u0438\u0434\u0440\u043e\u043b\u0438\u0437\u0430 \u043f\u0440\u043e\u0432\u043e\u0434\u0438\u043b\u0438\u0441\u044c \u0432 SE-\u0431\u0443\u0444\u0435\u0440\u0435 \u00abY\u00bb \u0432 \u043e\u0442\u0441\u0443\u0442\u0441\u0442\u0432\u0438\u0435 \u0438\u043b\u0438 \u043f\u0440\u0438\u0441\u0443\u0442\u0441\u0442\u0432\u0438\u0438 DMSO (10%, 20%, 25%) \u043f\u0440\u0438 \u043e\u043f\u0442\u0438\u043c\u0430\u043b\u044c\u043d\u043e\u0439 \u0442\u0435\u043c\u043f\u0435\u0440\u0430\u0442\u0443\u0440\u0435 (30\u00b0C) \u0432 \u0442\u0435\u0447\u0435\u043d\u0438\u0435 1 \u0447\u0430\u0441\u0430.<\/p>\n<p>\u041d\u0430 \u0440\u0438\u0441\u0443\u043d\u043a\u0435 2 \u043f\u0440\u0435\u0434\u0441\u0442\u0430\u0432\u043b\u0435\u043d\u043e \u0441\u0440\u0430\u0432\u043d\u0435\u043d\u0438\u0435 \u0430\u043a\u0442\u0438\u0432\u043d\u043e\u0441\u0442\u0435\u0439 \u043f\u0440\u0435\u043f\u0430\u0440\u0430\u0442\u043e\u0432 GlaI, \u0432\u044b\u0434\u0435\u043b\u0435\u043d\u043d\u044b\u0445 \u0438\u0437 \u0434\u0438\u043a\u043e\u0433\u043e \u0438 \u0440\u0435\u043a\u043e\u043c\u0431\u0438\u043d\u0430\u043d\u0442\u043d\u043e\u0433\u043e \u0448\u0442\u0430\u043c\u043c\u043e\u0432. \u0414\u043b\u044f \u0443\u0434\u043e\u0431\u0441\u0442\u0432\u0430 \u0441\u0440\u0430\u0432\u043d\u0435\u043d\u0438\u044f \u043f\u0440\u0435\u043f\u0430\u0440\u0430\u0442 \u0440\u0435\u043a\u043e\u043c\u0431\u0438\u043d\u0430\u043d\u0442\u043d\u043e\u0433\u043e GlaI \u0431\u044b\u043b \u043f\u0440\u0435\u0434\u0432\u0430\u0440\u0438\u0442\u0435\u043b\u044c\u043d\u043e \u0440\u0430\u0437\u0431\u0430\u0432\u043b\u0435\u043d \u0431\u0443\u0444\u0435\u0440\u043e\u043c \u0434\u043b\u044f \u0440\u0430\u0437\u0431\u0430\u0432\u043b\u0435\u043d\u0438\u044f \u0444\u0435\u0440\u043c\u0435\u043d\u0442\u043e\u0432 \u00ab\u0412100\u00bb \u0432 4 \u0440\u0430\u0437\u0430.[\/vc_column_text][vc_separator border_width=&#187;3&#8243;][vc_single_image image=&#187;138&#8243; img_size=&#187;large&#187; onclick=&#187;link_image&#187;][vc_column_text]\u0420\u0438\u0441\u0443\u043d\u043e\u043a 2. \u0421\u0440\u0430\u0432\u043d\u0435\u043d\u0438\u0435 \u0441\u0443\u0431\u0441\u0442\u0440\u0430\u0442\u043d\u043e\u0439 \u0441\u043f\u0435\u0446\u0438\u0444\u0438\u0447\u043d\u043e\u0441\u0442\u0438 \u0444\u0435\u0440\u043c\u0435\u043d\u0442\u0430 GlaI, \u0432\u044b\u0434\u0435\u043b\u0435\u043d\u043d\u043e\u0433\u043e \u0438\u0437 \u0434\u0438\u043a\u043e\u0433\u043e (I) \u0438 \u0440\u0435\u043a\u043e\u043c\u0431\u0438\u043d\u0430\u043d\u0442\u043d\u043e\u0433\u043e (II) \u0448\u0442\u0430\u043c\u043c\u0430, \u043d\u0430 \u0414\u041d\u041a pHspAI\/DriI. \u042d\u043b\u0435\u043a\u0442\u0440\u043e\u0444\u043e\u0440\u0435\u0437 \u0432 12% \u041f\u0410\u0410\u0413. \u0421\u043f\u0440\u0430\u0432\u0430 \u043f\u0440\u0438\u0432\u0435\u0434\u0435\u043d\u0430 \u0442\u0435\u043e\u0440\u0435\u0442\u0438\u0447\u0435\u0441\u043a\u0438 \u0440\u0430\u0441\u0441\u0447\u0438\u0442\u0430\u043d\u043d\u0430\u044f \u043a\u0430\u0440\u0442\u0438\u043d\u0430 \u0433\u0438\u0434\u0440\u043e\u043b\u0438\u0437\u0430 \u043f\u043b\u0430\u0437\u043c\u0438\u0434\u044b pHspAI\/DriI \u043f\u043e \u0441\u0430\u0439\u0442\u0430\u043c 5\u2019-R(5mC)GY-3\u2019 (\u043a\u0440\u0430\u0439\u043d\u044f\u044f \u0441\u043f\u0440\u0430\u0432\u0430) \u0438 \u0443\u043a\u0430\u0437\u0430\u043d\u044b \u0434\u043b\u0438\u043d\u044b \u043f\u043e\u043b\u0443\u0447\u0430\u0435\u043c\u044b\u0445 \u0444\u0440\u0430\u0433\u043c\u0435\u043d\u0442\u043e\u0432 \u0414\u041d\u041a. \u0414\u043e\u0440\u043e\u0436\u043a\u0438: 1-6 \u2013 \u043f\u043e\u0441\u043b\u0435\u0434\u043e\u0432\u0430\u0442\u0435\u043b\u044c\u043d\u044b\u0435 \u0440\u0430\u0437\u0432\u0435\u0434\u0435\u043d\u0438\u044f \u043f\u0440\u0435\u043f\u0430\u0440\u0430\u0442\u0430 \u0444\u0435\u0440\u043c\u0435\u043d\u0442\u0430 \u0432 2 \u0440\u0430\u0437\u0430, \u041c \u2013 \u0414\u041d\u041a-\u043c\u0430\u0440\u043a\u0451\u0440\u044b pUC19\/MspI.[\/vc_column_text][vc_separator border_width=&#187;3&#8243;][vc_column_text]\u0418\u0437 \u0434\u0430\u043d\u043d\u043e\u0433\u043e \u0440\u0438\u0441\u0443\u043d\u043a\u0430 \u0432\u0438\u0434\u043d\u043e, \u0447\u0442\u043e \u0440\u0435\u043a\u043e\u043c\u0431\u0438\u043d\u0430\u043d\u0442\u043d\u044b\u0439 \u0444\u0435\u0440\u043c\u0435\u043d\u0442 GlaI, \u043f\u043e\u0434\u043e\u0431\u043d\u043e \u043d\u0430\u0442\u0438\u0432\u043d\u043e\u043c\u0443 \u0444\u0435\u0440\u043c\u0435\u043d\u0442\u0443, \u0430\u043a\u0442\u0438\u0432\u0438\u0440\u0443\u0435\u0442\u0441\u044f \u043f\u0440\u0438\u0441\u0443\u0442\u0441\u0442\u0432\u0438\u0435\u043c \u0432 \u0440\u0435\u0430\u043a\u0446\u0438\u043e\u043d\u043d\u043e\u0439 \u0441\u043c\u0435\u0441\u0438 DMSO, \u043f\u0440\u0438\u0447\u0451\u043c \u043d\u0430\u0438\u0431\u043e\u043b\u044c\u0448\u0430\u044f \u0430\u043a\u0442\u0438\u0432\u043d\u043e\u0441\u0442\u044c \u043f\u0440\u043e\u044f\u0432\u043b\u044f\u0435\u0442\u0441\u044f \u043f\u0440\u0438 \u043a\u043e\u043d\u0446\u0435\u043d\u0442\u0440\u0430\u0446\u0438\u0438 DMSO 20%. \u0418\u0437 \u0440\u0438\u0441\u0443\u043d\u043a\u0430 \u0432\u0438\u0434\u043d\u043e \u0442\u0430\u043a\u0436\u0435, \u0447\u0442\u043e \u0441\u0443\u0431\u0441\u0442\u0440\u0430\u0442\u043d\u0430\u044f \u0441\u043f\u0435\u0446\u0438\u0444\u0438\u0447\u043d\u043e\u0441\u0442\u044c \u043e\u0431\u043e\u0438\u0445 \u043f\u0440\u0435\u043f\u0430\u0440\u0430\u0442\u043e\u0432 \u043d\u0430 pHspAI\/DriI \u043d\u0435 \u043e\u0442\u043b\u0438\u0447\u0430\u0435\u0442\u0441\u044f, \u043e\u0434\u043d\u0430\u043a\u043e \u043e\u0431\u0440\u0430\u0431\u043e\u0442\u043a\u0430 \u0414\u041d\u041a \u0440\u0435\u043a\u043e\u043c\u0431\u0438\u043d\u0430\u043d\u0442\u043d\u044b\u043c \u043f\u0440\u0435\u043f\u0430\u0440\u0430\u0442\u043e\u043c \u0444\u0435\u0440\u043c\u0435\u043d\u0442\u0430, \u0434\u0430\u0436\u0435 \u0440\u0430\u0437\u0431\u0430\u0432\u043b\u0435\u043d\u043d\u044b\u043c \u0432 4 \u0440\u0430\u0437\u0430, \u043f\u0440\u0438\u0432\u043e\u0434\u0438\u0442 \u043a \u0431\u043e\u043b\u0435\u0435 \u043f\u043e\u043b\u043d\u043e\u043c\u0443 \u0433\u0438\u0434\u0440\u043e\u043b\u0438\u0437\u0443 \u0441\u0443\u0431\u0441\u0442\u0440\u0430\u0442\u0430 \u043f\u043e \u0441\u0440\u0430\u0432\u043d\u0435\u043d\u0438\u044e \u0441 \u043d\u0430\u0442\u0438\u0432\u043d\u044b\u043c \u043f\u0440\u0435\u043f\u0430\u0440\u0430\u0442\u043e\u043c. \u041a\u0430\u0440\u0442\u0438\u043d\u0430 \u0433\u0438\u0434\u0440\u043e\u043b\u0438\u0437\u0430 \u0414\u041d\u041a \u043d\u0430 \u0434\u043e\u0440\u043e\u0436\u043a\u0435 1 (\u043d\u0430\u0442\u0438\u0432\u043d\u044b\u0439 \u0444\u0435\u0440\u043c\u0435\u043d\u0442), \u0447\u0443\u0442\u044c \u043b\u0443\u0447\u0448\u0435, \u0447\u0435\u043c \u043d\u0430 \u0434\u043e\u0440\u043e\u0436\u043a\u0435 3 (\u0440\u0435\u043a\u043e\u043c\u0431\u0438\u043d\u0430\u043d\u0442\u043d\u044b\u0439 \u0444\u0435\u0440\u043c\u0435\u043d\u0442), \u0447\u0442\u043e \u0441\u043e\u043e\u0442\u0432\u0435\u0442\u0441\u0442\u0432\u0443\u0435\u0442 \u0431\u043e\u043b\u0435\u0435 \u0447\u0435\u043c 10-\u0442\u0438\u043a\u0440\u0430\u0442\u043d\u043e\u043c\u0443 \u043f\u0440\u0435\u0432\u044b\u0448\u0435\u043d\u0438\u044e \u043a\u043e\u043d\u0446\u0435\u043d\u0442\u0440\u0430\u0446\u0438\u0438 \u043a\u043b\u043e\u043d\u0438\u0440\u043e\u0432\u0430\u043d\u043d\u043e\u0433\u043e GlaI.<\/p>\n<p>\u0414\u0430\u043b\u0435\u0435 \u043c\u044b \u043f\u0440\u043e\u0432\u043e\u0434\u0438\u043b\u0438 \u0441\u0440\u0430\u0432\u043d\u0438\u0442\u0435\u043b\u044c\u043d\u044b\u0439 \u0430\u043d\u0430\u043b\u0438\u0437 \u0430\u043a\u0442\u0438\u0432\u043d\u043e\u0441\u0442\u0438 \u043d\u0430\u0442\u0438\u0432\u043d\u043e\u0433\u043e \u0438 \u0440\u0435\u043a\u043e\u043c\u0431\u0438\u043d\u0430\u043d\u0442\u043d\u043e\u0433\u043e \u0444\u0435\u0440\u043c\u0435\u043d\u0442\u043e\u0432 \u043d\u0430 \u0440\u0430\u0437\u043b\u0438\u0447\u043d\u044b\u0445 5-\u043c\u0435\u0442\u0438\u043b\u0446\u0438\u0442\u043e\u0437\u0438\u043d \u0441\u043e\u0434\u0435\u0440\u0436\u0430\u0449\u0438\u0445 \u0414\u041d\u041a. \u0412 \u043a\u0430\u0447\u0435\u0441\u0442\u0432\u0435 \u043a\u043e\u043d\u0442\u0440\u043e\u043b\u044f \u0438\u0441\u043f\u043e\u043b\u044c\u0437\u043e\u0432\u0430\u043b\u0438 \u0414\u041d\u041a \u0444\u0430\u0433\u0430 \u03bb. \u0412 \u0440\u0430\u0431\u043e\u0442\u0435 \u0438\u0441\u043f\u043e\u043b\u044c\u0437\u043e\u0432\u0430\u043b\u0438 \u0441\u043b\u0435\u0434\u0443\u044e\u0449\u0438\u0435 \u043f\u043b\u0430\u0437\u043c\u0438\u0434\u044b:<\/p>\n<ul>\n<li>pMHpaII (\u043d\u0435\u0441\u0451\u0442 \u0433\u0435\u043d \u043c\u0435\u0442\u0438\u043b\u0430\u0437\u044b M.HpaII, \u043c\u0435\u0442\u0438\u043b\u0438\u0440\u0443\u044e\u0449\u0435\u0439 \u0432\u0442\u043e\u0440\u043e\u0439 \u0446\u0438\u0442\u043e\u0437\u0438\u043d \u0432 \u043f\u043e\u0441\u043b\u0435\u0434\u043e\u0432\u0430\u0442\u0435\u043b\u044c\u043d\u043e\u0441\u0442\u0438 5&#8242;-C\u0421GG-3&#8242;, \u0438 \u0441\u043e\u0434\u0435\u0440\u0436\u0438\u0442 \u043c\u0435\u0442\u0438\u043b\u0438\u0440\u043e\u0432\u0430\u043d\u043d\u044b\u0435 \u0441\u0430\u0439\u0442\u044b 5\u2019-C(5mC)GG-3\u2019\/3\u2019-GG(5mC)C-5\u2019 [16]);<\/li>\n<li>pMHaeIII (\u043d\u0435\u0441\u0451\u0442 \u0433\u0435\u043d \u043c\u0435\u0442\u0438\u043b\u0430\u0437\u044b M.HaeIII, \u043c\u0435\u0442\u0438\u043b\u0438\u0440\u0443\u044e\u0449\u0435\u0439 \u043f\u0435\u0440\u0432\u044b\u0439 \u0446\u0438\u0442\u043e\u0437\u0438\u043d \u0432 \u043f\u043e\u0441\u043b\u0435\u0434\u043e\u0432\u0430\u0442\u0435\u043b\u044c\u043d\u043e\u0441\u0442\u0438 5&#8242;-GGC\u0421-3&#8242;, \u0438 \u0441\u043e\u0434\u0435\u0440\u0436\u0438\u0442 \u043c\u0435\u0442\u0438\u043b\u0438\u0440\u043e\u0432\u0430\u043d\u043d\u044b\u0435 \u0441\u0430\u0439\u0442\u044b 5\u2019- GG(5mC)C -3\u2019\/3\u2019- C (5mC) GG -5\u2019 [17]);<\/li>\n<li>pFsp4HI3 (\u043d\u0435\u0441\u0451\u0442 \u0433\u0435\u043d \u043c\u0435\u0442\u0438\u043b\u0430\u0437\u044b M.Fsp4HI, \u043c\u0435\u0442\u0438\u043b\u0438\u0440\u0443\u044e\u0449\u0435\u0439 \u043f\u0435\u0440\u0432\u044b\u0439 \u0446\u0438\u0442\u043e\u0437\u0438\u043d \u0432 \u043f\u043e\u0441\u043b\u0435\u0434\u043e\u0432\u0430\u0442\u0435\u043b\u044c\u043d\u043e\u0441\u0442\u0438 5&#8242;-GCNGC-3&#8242;, \u0438 \u0441\u043e\u0434\u0435\u0440\u0436\u0438\u0442 \u043c\u0435\u0442\u0438\u043b\u0438\u0440\u043e\u0432\u0430\u043d\u043d\u044b\u0435 \u0441\u0430\u0439\u0442\u044b 5\u2019-G(5mC)NGC-3\u2019\/3\u2019-CGN(5mC)G-5\u2019 [8]);<\/li>\n<li>pBspACI (\u043d\u0435\u0441\u0451\u0442 \u0433\u0435\u043d\u044b \u043c\u0435\u0442\u0438\u043b\u0430\u0437 M1.BspACI \u0438 M2.BspACI \u0438 \u0441\u043e\u0434\u0435\u0440\u0436\u0438\u0442 \u043c\u0435\u0442\u0438\u043b\u0438\u0440\u043e\u0432\u0430\u043d\u043d\u044b\u0435 \u043f\u043e\u0441\u043b\u0435\u0434\u043e\u0432\u0430\u0442\u0435\u043b\u044c\u043d\u043e\u0441\u0442\u0438 5\u2019- (5mC)CGC -3\u2019\/3\u2019- GG(5mC)G -5\u2019 [18]);<\/li>\n<li>pHspAI (\u043d\u0435\u0441\u0451\u0442 \u0433\u0435\u043d \u043c\u0435\u0442\u0438\u043b\u0430\u0437\u044b M. HspAI, \u043c\u0435\u0442\u0438\u043b\u0438\u0440\u0443\u044e\u0449\u0435\u0439 \u043f\u0435\u0440\u0432\u044b\u0439 \u0446\u0438\u0442\u043e\u0437\u0438\u043d \u0432 \u043f\u043e\u0441\u043b\u0435\u0434\u043e\u0432\u0430\u0442\u0435\u043b\u044c\u043d\u043e\u0441\u0442\u0438 5&#8242;-GCGC-3&#8242;, \u0438 \u0441\u043e\u0434\u0435\u0440\u0436\u0438\u0442 \u043c\u0435\u0442\u0438\u043b\u0438\u0440\u043e\u0432\u0430\u043d\u043d\u044b\u0435 \u0441\u0430\u0439\u0442\u044b 5\u2019-G(5mC)GC-3\u2019\/3\u2019-CG(5mC)G-5\u2019 [9]).<\/li>\n<\/ul>\n<p>\u041f\u043e\u0441\u043a\u043e\u043b\u044c\u043a\u0443 \u0433\u0438\u0434\u0440\u043e\u043b\u0438\u0437 \u0414\u041d\u041a \u0443\u0434\u043e\u0431\u043d\u0435\u0435 \u0430\u043d\u0430\u043b\u0438\u0437\u0438\u0440\u043e\u0432\u0430\u0442\u044c \u043d\u0435 \u043d\u0430 \u043a\u043e\u043b\u044c\u0446\u0435\u0432\u043e\u0439, \u0430 \u043d\u0430 \u043b\u0438\u043d\u0435\u0439\u043d\u043e\u0439 \u0444\u043e\u0440\u043c\u0435 \u0414\u041d\u041a, \u0432\u0441\u0435 \u043f\u043b\u0430\u0437\u043c\u0438\u0434\u044b \u0431\u044b\u043b\u0438 \u043f\u0440\u0435\u0434\u0432\u0430\u0440\u0438\u0442\u0435\u043b\u044c\u043d\u043e \u043b\u0438\u043d\u0435\u0430\u0440\u0438\u0437\u043e\u0432\u0430\u043d\u044b \u0441 \u043f\u043e\u043c\u043e\u0449\u044c\u044e \u044d\u043d\u0434\u043e\u043d\u0443\u043a\u043b\u0435\u0430\u0437\u044b \u0440\u0435\u0441\u0442\u0440\u0438\u043a\u0446\u0438\u0438 DriI. \u0420\u0435\u0430\u043a\u0446\u0438\u0438 \u043f\u0440\u043e\u0432\u043e\u0434\u0438\u043b\u0438\u0441\u044c \u0432 SE-\u0431\u0443\u0444\u0435\u0440\u0435 \u00abY\u00bb \u0432 \u043f\u0440\u0438\u0441\u0443\u0442\u0441\u0442\u0432\u0438\u0438 20% DMSO.<\/p>\n<p>\u041d\u0430 \u0440\u0438\u0441. 3 \u043f\u0440\u0435\u0434\u0441\u0442\u0430\u0432\u043b\u0435\u043d\u0430 \u044d\u043b\u0435\u043a\u0442\u0440\u043e\u0444\u043e\u0440\u0435\u0433\u0440\u0430\u043c\u043c\u0430 \u043f\u0440\u043e\u0434\u0443\u043a\u0442\u043e\u0432 \u0440\u0430\u0441\u0449\u0435\u043f\u043b\u0435\u043d\u0438\u044f \u0434\u0430\u043d\u043d\u044b\u0445 \u0441\u0443\u0431\u0441\u0442\u0440\u0430\u0442\u043e\u0432 \u0440\u0435\u043a\u043e\u043c\u0431\u0438\u043d\u0430\u043d\u0442\u043d\u044b\u043c GlaI.[\/vc_column_text][vc_row_inner][vc_column_inner width=&#187;1\/2&#8243;][vc_single_image image=&#187;139&#8243; img_size=&#187;medium&#187; onclick=&#187;link_image&#187;][\/vc_column_inner][vc_column_inner width=&#187;1\/2&#8243;][vc_column_text]\u0420\u0438\u0441\u0443\u043d\u043e\u043a 3. \u0410\u043d\u0430\u043b\u0438\u0437 \u0441\u0443\u0431\u0441\u0442\u0440\u0430\u0442\u043d\u043e\u0439 \u0441\u043f\u0435\u0446\u0438\u0444\u0438\u0447\u043d\u043e\u0441\u0442\u0438 \u0440\u0435\u043a\u043e\u043c\u0431\u0438\u043d\u0430\u043d\u0442\u043d\u043e\u0433\u043e GlaI. \u042d\u043b\u0435\u043a\u0442\u0440\u043e\u0444\u043e\u0440\u0435\u0437 \u0432 1% \u0430\u0433\u0430\u0440\u043e\u0437\u043d\u043e\u043c \u0433\u0435\u043b\u0435. \u0414\u043e\u0440\u043e\u0436\u043a\u0438: I \u2013 \u0414\u041d\u041a \u0444\u0430\u0433\u0430 \u03bb; \u00a0II \u2013 pMHpaII\/DriI; \u00a0III \u2013 pMHaeIII\/DriI; IV-\u00a0 pFspAI3\/DriI; V \u2013 pBspACI\/DriI; VI \u2013 pHspAI\/DriI. \u00a01 \u2013 \u0414\u041d\u041a \u0431\u0435\u0437 \u0434\u043e\u0431\u0430\u0432\u043b\u0435\u043d\u0438\u044f \u0444\u0435\u0440\u043c\u0435\u043d\u0442\u0430; 2 \u2013 \u0414\u041d\u041a \u0441 \u0434\u043e\u0431\u0430\u0432\u043b\u0435\u043d\u0438\u0435\u043c \u0440\u0435\u043a\u043e\u043c\u0431\u0438\u043d\u0430\u043d\u0442\u043d\u043e\u0433\u043e GlaI; 3 \u2013 \u0414\u041d\u041a \u0441 \u0434\u043e\u0431\u0430\u0432\u043b\u0435\u043d\u0438\u0435\u043c \u043d\u0430\u0442\u0438\u0432\u043d\u043e\u0433\u043e GlaI (\u043a\u043e\u043d\u0442\u0440\u043e\u043b\u044c); \u041c \u2013 \u0414\u041d\u041a-\u043c\u0430\u0440\u043a\u0451\u0440\u044b 1kb.[\/vc_column_text][\/vc_column_inner][\/vc_row_inner][vc_separator border_width=&#187;3&#8243;][vc_column_text]\u0418\u0437 \u0440\u0438\u0441\u0443\u043d\u043a\u0430 \u0432\u0438\u0434\u043d\u043e, \u0440\u0435\u043a\u043e\u043c\u0431\u0438\u043d\u0430\u043d\u0442\u043d\u044b\u0439 GlaI \u043d\u0435 \u0440\u0430\u0441\u0449\u0435\u043f\u043b\u044f\u0435\u0442 \u043d\u0435\u043c\u0435\u0442\u0438\u043b\u0438\u0440\u043e\u0432\u0430\u043d\u043d\u044b\u0439 \u0441\u0443\u0431\u0441\u0442\u0440\u0430\u0442 (\u0414\u041d\u041a \u0444\u0430\u0433\u0430 \u03bb), \u0430 \u0442\u0430\u043a\u0436\u0435 \u0432\u0441\u0435 \u04215-\u043c\u0435\u0442\u0438\u043b\u0438\u0440\u043e\u0432\u0430\u043d\u043d\u044b\u0435 \u0441\u0443\u0431\u0441\u0442\u0440\u0430\u0442\u044b, \u043a\u0440\u043e\u043c\u0435 \u043f\u043b\u0430\u0437\u043c\u0438\u0434\u044b pHspAI. \u0418\u0437 \u043f\u0440\u0435\u0434\u0441\u0442\u0430\u0432\u043b\u0435\u043d\u043d\u044b\u0445 \u0434\u0430\u043d\u043d\u044b\u0445 \u043c\u043e\u0436\u043d\u043e \u0437\u0430\u043a\u043b\u044e\u0447\u0438\u0442\u044c, \u0447\u0442\u043e \u0441\u0443\u0431\u0441\u0442\u0440\u0430\u0442\u043d\u0430\u044f \u0441\u043f\u0435\u0446\u0438\u0444\u0438\u0447\u043d\u043e\u0441\u0442\u044c \u0440\u0435\u043a\u043e\u043c\u0431\u0438\u043d\u0430\u043d\u0442\u043d\u043e\u0433\u043e \u0438 \u043d\u0430\u0442\u0438\u0432\u043d\u043e\u0433\u043e \u0444\u0435\u0440\u043c\u0435\u043d\u0442\u0430 \u0441\u043e\u0432\u043f\u0430\u0434\u0430\u044e\u0442. \u0424\u0435\u0440\u043c\u0435\u043d\u0442 GlaI \u0443\u0437\u043d\u0430\u0451\u0442 \u0438 \u0440\u0430\u0441\u0449\u0435\u043f\u043b\u044f\u0435\u0442 \u043f\u043e\u0441\u043b\u0435\u0434\u043e\u0432\u0430\u0442\u0435\u043b\u044c\u043d\u043e\u0441\u0442\u044c 5\u2019-G(5mC)GC-3\u2019\/3\u2019-CG(5mC)G-5\u2019 \u0438 \u043d\u0435 \u0433\u0438\u0434\u0440\u043e\u043b\u0438\u0437\u0443\u0435\u0442 \u0434\u0440\u0443\u0433\u0438\u0435 \u0441\u0430\u0439\u0442\u044b \u0441 5-\u043c\u0435\u0442\u0438\u043b\u0446\u0438\u0442\u043e\u0437\u0438\u043d\u043e\u043c \u0432 \u043e\u0431\u0435\u0438\u0445 \u0446\u0435\u043f\u044f\u0445 \u0414\u041d\u041a [2].<\/p>\n<p>\u041f\u043e\u043b\u0443\u0447\u0435\u043d\u043d\u044b\u0435 \u0440\u0435\u0437\u0443\u043b\u044c\u0442\u0430\u0442\u044b \u043f\u043e\u0434\u0442\u0432\u0435\u0440\u0436\u0434\u0430\u044e\u0442, \u0447\u0442\u043e \u043f\u0440\u0435\u043f\u0430\u0440\u0430\u0442 \u0444\u0435\u0440\u043c\u0435\u043d\u0442\u0430 GlaI, \u043f\u043e\u043b\u0443\u0447\u0435\u043d\u043d\u044b\u0439 \u0438\u0437 \u0440\u0435\u043a\u043e\u043c\u0431\u0438\u043d\u0430\u043d\u0442\u043d\u043e\u0433\u043e \u0448\u0442\u0430\u043c\u043c\u0430, \u043e\u0431\u043b\u0430\u0434\u0430\u044f \u043d\u0430 \u043f\u043e\u0440\u044f\u0434\u043e\u043a \u0431\u043e\u043b\u044c\u0448\u0435\u0439 \u0430\u043a\u0442\u0438\u0432\u043d\u043e\u0441\u0442\u044c\u044e, \u043f\u0440\u043e\u044f\u0432\u043b\u044f\u0435\u0442 \u043f\u0440\u0438 \u044d\u0442\u043e\u043c \u0442\u0443 \u0436\u0435 \u0441\u0443\u0431\u0441\u0442\u0440\u0430\u0442\u043d\u0443\u044e \u0441\u043f\u0435\u0446\u0438\u0444\u0438\u0447\u043d\u043e\u0441\u0442\u044c, \u0447\u0442\u043e \u0438 \u0444\u0435\u0440\u043c\u0435\u043d\u0442, \u0432\u044b\u0434\u0435\u043b\u0435\u043d\u043d\u044b\u0439 \u0438\u0437 \u0438\u0441\u0445\u043e\u0434\u043d\u043e\u0433\u043e \u0448\u0442\u0430\u043c\u043c\u0430 <em>Glacial<\/em> <em>ice<\/em> <em>bacterium<\/em>. \u0422\u0430\u043a\u0438\u043c \u043e\u0431\u0440\u0430\u0437\u043e\u043c, \u0438\u0441\u043f\u043e\u043b\u044c\u0437\u043e\u0432\u0430\u043d\u0438\u0435 \u0440\u0435\u043a\u043e\u043c\u0431\u0438\u043d\u0430\u043d\u0442\u043d\u043e\u0433\u043e GlaI \u043f\u043e\u0437\u0432\u043e\u043b\u044f\u0435\u0442 \u0434\u043e\u0431\u0438\u0442\u044c\u0441\u044f \u0431\u043e\u043b\u0435\u0435 \u043f\u043e\u043b\u043d\u043e\u0433\u043e \u0433\u0438\u0434\u0440\u043e\u043b\u0438\u0437\u0430 \u0430\u043d\u0430\u043b\u0438\u0437\u0438\u0440\u0443\u0435\u043c\u044b\u0445 \u043e\u0431\u0440\u0430\u0437\u0446\u043e\u0432 \u0414\u041d\u041a, \u0447\u0442\u043e \u043d\u0435\u0441\u043e\u043c\u043d\u0435\u043d\u043d\u043e \u0443\u043b\u0443\u0447\u0448\u0438\u0442 \u0440\u0435\u0437\u0443\u043b\u044c\u0442\u0430\u0442\u044b \u044d\u043f\u0438\u0433\u0435\u043d\u0435\u0442\u0438\u0447\u0435\u0441\u043a\u0438\u0445 \u0438\u0441\u0441\u043b\u0435\u0434\u043e\u0432\u0430\u043d\u0438\u0439 \u0441 \u043f\u0440\u0438\u043c\u0435\u043d\u0435\u043d\u0438\u0435\u043c \u044d\u0442\u043e\u0433\u043e \u0444\u0435\u0440\u043c\u0435\u043d\u0442\u0430.[\/vc_column_text][vc_column_text]<\/p>\n<h2>\u041b\u0418\u0422\u0415\u0420\u0410\u0422\u0423\u0420\u0410<\/h2>\n<ol>\n<li><a class=\"menuLeftSelected\" title=\"site-specific DNA-endonuclease that recognizes a short methylated DNA sequence (recognition site) and hydrolyzes phosphodiester bond in both DNA strands at definite position within or near this site\" href=\"http:\/\/sibenzyme.com\/products\/m2_type\">Methyl-directed DNA endonucleases<\/a><\/li>\n<li>\u0422\u0430\u0440\u0430\u0441\u043e\u0432\u0430 \u0413.\u0412., \u041d\u0430\u044f\u043a\u0448\u0438\u043d\u0430 \u0422.\u041d., \u0414\u0435\u0433\u0442\u044f\u0440\u0435\u0432 \u0421.\u0425. \u0421\u0443\u0431\u0441\u0442\u0440\u0430\u0442\u043d\u0430\u044f \u0441\u043f\u0435\u0446\u0438\u0444\u0438\u0447\u043d\u043e\u0441\u0442\u044c \u043d\u043e\u0432\u043e\u0439 \u0414\u041d\u041a-\u044d\u043d\u0434\u043e\u043d\u0443\u043a\u043b\u0435\u0430\u0437\u044b GlaI. \/\/ BMC Molecular Biology. 2008. 9:7.<\/li>\n<li>Handa V., Jeltsch A. Profound flanking sequence preference of Dnmt3a and Dnmt3b mammalian DNA methyltransferases shape the human epigenome. \/\/ J. Mol. Biol. 2005. 348(5): 1103-1112.<\/li>\n<li>Gonchar D.A., Akishev A.G., Degtyarev S.Kh<strong>.<\/strong> BlsI- and GlaI-PCR assays \u2013 a new method of DNA methylation study. \/\/ Ovchinnikov bulletin of biotechnology and physical and chemical biology. 2010. V.6. No. 1. P. 5-12.<\/li>\n<li>Kuznetsov V.V., Abdurashitov M.A., Akishev A.G., Degtyarev S.H<strong>.<\/strong> Method of determining nucleotide sequence Pu(5mC)GPy at predetermined position of long-distance DNA. \/\/ Russian Federation patent RU 2525710 C1. 2014.<\/li>\n<li>Abdurashitov M.A., Tomilov V.N., Gonchar D.A., Kuznetsov V.V., Degtyarev S.Kh. Mapping of R(5mC)GY Sites in the Genome of Human Malignant Cell Line Raji. \/\/ Biol. Med. (Aligarh). 2015. V. 7. Is. 4. BM-135-15.<\/li>\n<li>\u0427\u043c\u0443\u0436 \u0415.\u0412., \u041a\u0430\u0448\u0438\u0440\u0438\u043d\u0430 \u042e.\u0413., \u0422\u043e\u043c\u0438\u043b\u043e\u0432\u0430 \u042e.\u042d., \u041c\u0435\u0437\u0435\u043d\u0446\u0435\u0432\u0430 \u041d.\u0412., \u0414\u0435\u0434\u043a\u043e\u0432 \u0412.\u0421., \u0413\u043e\u043d\u0447\u0430\u0440 \u0414.\u0410., \u0410\u0431\u0434\u0443\u0440\u0430\u0448\u0438\u0442\u043e\u0432 \u041c.\u0410., \u0414\u0435\u0433\u0442\u044f\u0440\u0435\u0432 \u0421.\u0425. \u041d\u043e\u0432\u0430\u044f \u044d\u043d\u0434\u043e\u043d\u0443\u043a\u043b\u0435\u0430\u0437\u0430 \u0440\u0435\u0441\u0442\u0440\u0438\u043a\u0446\u0438\u0438 BisI \u0438\u0437 Bacillus subtilis \u042230 \u0443\u0437\u043d\u0430\u0435\u0442 \u043c\u0435\u0442\u0438\u043b\u0438\u0440\u043e\u0432\u0430\u043d\u043d\u0443\u044e \u043f\u043e\u0441\u043b\u0435\u0434\u043e\u0432\u0430\u0442\u0435\u043b\u044c\u043d\u043e\u0441\u0442\u044c \u0414\u041d\u041a 5\u2019G(5mC)^NGC-3\u2019. \/\/ \u0411\u0438\u043e\u0442\u0435\u0445\u043d\u043e\u043b\u043e\u0433\u0438\u044f. 2005. \u21163. \u0421.22-26.<\/li>\n<li>\u0427\u0435\u0440\u043d\u0443\u0445\u0438\u043d \u0412.\u0410., \u0427\u043c\u0443\u0436 \u0415.\u0412., \u0422\u043e\u043c\u0438\u043b\u043e\u0432\u0430 \u042e.\u042d., \u041d\u0430\u044f\u043a\u0448\u0438\u043d\u0430 \u0422.\u041d., \u0413\u043e\u043d\u0447\u0430\u0440 \u0414.\u0410., \u0414\u0435\u0434\u043a\u043e\u0432 \u0412.\u0421., \u0414\u0435\u0433\u0442\u044f\u0440\u0435\u0432 \u0421.\u0425. \u041d\u043e\u0432\u0430\u044f \u0441\u0430\u0439\u0442-\u0441\u043f\u0435\u0446\u0438\u0444\u0438\u0447\u0435\u0441\u0447\u043a\u0430\u044f \u044d\u043d\u0434\u043e\u043d\u043a\u043b\u0435\u0430\u0437\u0430 GluI \u0443\u0437\u043d\u0430\u0451\u0442 \u043c\u0435\u0442\u0438\u043b\u0438\u0440\u043e\u0432\u0430\u043d\u043d\u0443\u044e \u043f\u043e\u0441\u043b\u0435\u0434\u043e\u0432\u0430\u0442\u0435\u043b\u044c\u043d\u043e\u0441\u0442\u044c \u0414\u041d\u041a 5\u2019-G(5mC)NG(5mC)-3\u2019\/3\u2019-(5mC)GN(5mC)G-5\u2019. \/\/ \u0412\u0435\u0441\u0442\u043d\u0438\u043a \u0431\u0438\u043e\u0442\u0435\u0445\u043d\u043e\u043b\u043e\u0433\u0438\u0438 \u0438 \u0444\u0438\u0437\u0438\u043a\u043e-\u0445\u0438\u043c\u0438\u0447\u0435\u0441\u043a\u043e\u0439 \u0431\u0438\u043e\u043b\u043e\u0433\u0438\u0438 \u0438\u043c\u0435\u043d\u0438 \u042e.\u0410. \u041e\u0432\u0447\u0438\u043d\u043d\u0438\u043a\u043e\u0432\u0430. 2007. \u0422.3. \u21162. \u0421.13-17.<\/li>\n<li>\u0427\u0435\u0440\u043d\u0443\u0445\u0438\u043d \u0412.\u0410., \u041d\u0430\u044f\u043a\u0448\u0438\u043d\u0430 \u0422.\u041d., \u0410\u0431\u0434\u0443\u0440\u0430\u0448\u0438\u0442\u043e\u0432 \u041c.\u0410., \u0422\u043e\u043c\u0438\u043b\u043e\u0432\u0430 \u042e.\u042d., \u041c\u0435\u0437\u0435\u043d\u0446\u0435\u0432\u0430 \u041d.\u0412., \u0414\u0435\u0434\u043a\u043e\u0432 \u0412.\u0421., \u041c\u0438\u0445\u043d\u0435\u043d\u043a\u043e\u0432\u0430 \u041d.\u0410., \u0413\u043e\u043d\u0447\u0430\u0440 \u0414.\u0410., \u0414\u0435\u0433\u0442\u044f\u0440\u0435\u0432 \u0421.\u0425. \u041d\u043e\u0432\u0430\u044f \u044d\u043d\u0434\u043e\u043d\u0443\u043a\u043b\u0435\u0430\u0437\u0430 \u0440\u0435\u0441\u0442\u0440\u0438\u043a\u0446\u0438\u0438 GlaI \u0443\u0437\u043d\u0430\u0451\u0442 \u043c\u0435\u0442\u0438\u043b\u0438\u0440\u043e\u0432\u0430\u043d\u043d\u0443\u044e \u043f\u043e\u0441\u043b\u0435\u0434\u043e\u0432\u0430\u0442\u0435\u043b\u044c\u043d\u043e\u0441\u0442\u044c 5\u2019-GCGC-3\u2019. \/\/ \u0411\u0438\u043e\u0442\u0435\u0445\u043d\u043e\u043b\u043e\u0433\u0438\u044f. 2006. \u21164. \u0421.31\u201335.<\/li>\n<li>Smith C.L., Klco S.R. and Cantor C.R. In: Davies K. (ed.). <em>Genome Analysis: A Practical Approach<\/em>. 1987. IRL Press. Oxford. UK.<\/li>\n<li>Yanisch-Perron C., Vieira J., Messing J. Improved M13 phage cloning vectors and host strains: nucleotide sequences of the M13mp18 and pUC19 vectors. \/\/ Gene. 1985. V.33. P.103-119.<\/li>\n<li>Sambrook J., Fritsch E.F., Maniatis T. Molecular cloning: a laboratopy manual. 1987. Cold Spring Harbor Laboratory Press, USA.<\/li>\n<li>\u0414\u0435\u0434\u043a\u043e\u0432 \u0412.\u0421., \u0413\u043e\u043d\u0447\u0430\u0440 \u0414.\u0410., \u0427\u0435\u0440\u043d\u0443\u0445\u0438\u043d \u0412.\u0410., \u0410\u0431\u0434\u0443\u0440\u0430\u0448\u0438\u0442\u043e\u0432 \u041c.\u0410., \u041b\u043e\u043c\u0430\u043a\u043e\u0432\u0441\u043a\u0430\u044f \u0415.\u041d., \u0428\u0438\u043d\u043a\u0430\u0440\u0435\u043d\u043a\u043e \u041d.\u041c., \u0414\u0435\u0433\u0442\u044f\u0440\u0451\u0432 \u0421.\u0425. \u041a\u043b\u043e\u043d\u0438\u0440\u043e\u0432\u0430\u043d\u0438\u0435 \u0441\u0438\u0441\u0442\u0435\u043c\u044b \u0440\u0435\u0441\u0442\u0440\u0438\u043a\u0446\u0438\u0438-\u043c\u043e\u0434\u0438\u0444\u0438\u043a\u0430\u0446\u0438\u0438 BpuN4I \u0438\u0437 Bacillus pumilus N4. \/\/ \u0412\u0435\u0441\u0442\u043d\u0438\u043a \u0431\u0438\u043e\u0442\u0435\u0445\u043d\u043e\u043b\u043e\u0433\u0438\u0438 \u0438 \u0444\u0438\u0437\u0438\u043a\u043e-\u0445\u0438\u043c\u0438\u0447\u0435\u0441\u043a\u043e\u0439 \u0431\u0438\u043e\u043b\u043e\u0433\u0438\u0438 \u0438\u043c\u0435\u043d\u0438 \u042e. \u0410. \u041e\u0432\u0447\u0438\u043d\u043d\u0438\u043a\u043e\u0432\u0430. 2013. \u0422.9. \u21163. \u0421.40-47.<\/li>\n<li>Chambers S.P., Prior S.E., Barstow D.A., Minton N.P. The pMTLnic<sup>&#8212;<\/sup> cloning vectors. I. Improved pUC polylinker regions to facilitate the use of sonicated DNA for nucleotide sequencing. \/\/ Gene. 1998. V.68. P.139-149.<\/li>\n<li>Abdurashitov M.A., Chernukhin V.A., Gonchar D.A., Dedkov V.S., Mikhnenkova N.A. and Degtyarev S.Kh. Dimethyl Sulfoxide Changes the Recognition Site Preference of Methyl- directed Site-specific DNA Endonuclease GlaI. \/\/ Research Journal of Pharmaceutical, Biological and Chemical Sciences. 2016. \u21167(1). P.1733-1739.<\/li>\n<li>\u0427\u0435\u0440\u043d\u0443\u0445\u0438\u043d \u0412.\u0410., \u041a\u0438\u043b\u0435\u0432\u0430 \u0415.\u0412., \u0422\u043e\u043c\u0438\u043b\u043e\u0432\u0430 \u042e.\u042d., \u0411\u043e\u043b\u0442\u0435\u043d\u0433\u0430\u0433\u0435\u043d \u0410.\u0410., \u0414\u0435\u0434\u043a\u043e\u0432 \u0412.\u0421., \u041c\u0438\u0445\u043d\u0435\u043d\u043a\u043e\u0432\u0430 \u041d.\u0410., \u0413\u043e\u043d\u0447\u0430\u0440 \u0414.\u0410., \u0413\u043e\u043b\u0438\u043a\u043e\u0432\u0430 \u041b.\u041d., \u0414\u0435\u0433\u0442\u044f\u0440\u0435\u0432 \u0421.\u0425. \u041d\u043e\u0432\u0430\u044f \u043c\u0435\u0442\u0438\u043b\u0437\u0430\u0432\u0438\u0441\u0438\u043c\u0430\u044f \u0441\u0430\u0439\u0442-\u0441\u043f\u0435\u0446\u0438\u0444\u0438\u0447\u0435\u0441\u043a\u0430\u044f \u044d\u043d\u0434\u043e\u043d\u0443\u043a\u043b\u0435\u0430\u0437\u0430 KroI \u0443\u0437\u043d\u0430\u0435\u0442 \u0438 \u0440\u0430\u0441\u0449\u0435\u043f\u043b\u044f\u0435\u0442 \u043f\u043e\u0441\u043b\u0435\u0434\u043e\u0432\u0430\u0442\u0435\u043b\u044c\u043d\u043e\u0441\u0442\u044c \u0414\u041d\u041a 5`-G^C(5mC)GGC-3`. \/\/ \u0412\u0435\u0441\u0442\u043d\u0438\u043a \u0431\u0438\u043e\u0442\u0435\u0445\u043d\u043e\u043b\u043e\u0433\u0438\u0438 \u0438 \u0444\u0438\u0437\u0438\u043a\u043e-\u0445\u0438\u043c\u0438\u0447\u0435\u0441\u043a\u043e\u0439 \u0431\u0438\u043e\u043b\u043e\u0433\u0438\u0438 \u0438\u043c\u0435\u043d\u0438 \u042e. \u0410. \u041e\u0432\u0447\u0438\u043d\u043d\u0438\u043a\u043e\u0432\u0430. 2011. \u0422.7. \u21161. \u0421.14-20.<\/li>\n<li>\u0427\u0435\u0440\u043d\u0443\u0445\u0438\u043d \u0412.\u0410., \u0411\u0435\u043b\u0438\u0447\u0435\u043d\u043a\u043e \u041e.\u0410., \u0422\u0430\u0440\u0430\u0441\u043e\u0432\u0430 \u0413.\u0412., \u0413\u043e\u043d\u0447\u0430\u0440 \u0414.\u0410., \u0410\u043a\u0438\u0448\u0435\u0432 \u0410.\u0413., \u0414\u0435\u0434\u043a\u043e\u0432 \u0412.\u0421., \u041c\u0438\u0445\u043d\u0435\u043d\u043a\u043e\u0432\u0430 \u041d.\u0410., \u0414\u0435\u0433\u0442\u044f\u0440\u0435\u0432 \u0421.\u0425. \u0428\u0442\u0430\u043c\u043c \u0431\u0430\u043a\u0442\u0435\u0440\u0438\u0438 Arthrobacter oxydans &#8212; \u043f\u0440\u043e\u0434\u0443\u0446\u0435\u043d\u0442 \u0441\u0430\u0439\u0442-\u0441\u043f\u0435\u0446\u0438\u0444\u0438\u0447\u0435\u0441\u043a\u043e\u0439 \u044d\u043d\u0434\u043e\u043d\u0443\u043a\u043b\u0435\u0430\u0437\u044b AoxI. \/\/ \u041f\u0430\u0442\u0435\u043d\u0442 \u043d\u0430 \u0438\u0437\u043e\u0431\u0440\u0435\u0442\u0435\u043d\u0438\u0435 RU 2399663 \u04211. 2009.<\/li>\n<li>\u0422\u0430\u0440\u0430\u0441\u043e\u0432\u0430 \u041c.\u0412., \u0414\u0436\u0430\u043d\u043e\u0431\u0438\u043b\u043e\u0432\u0430 \u0417.\u041a., \u0422\u043e\u043c\u0438\u043b\u043e\u0432\u0430 \u042e.\u042d., \u0414\u0435\u0434\u043a\u043e\u0432 \u0412.\u0421., \u0427\u0435\u0440\u043d\u0443\u0445\u0438\u043d \u0412.\u0410., \u0414\u0435\u0433\u0442\u044f\u0440\u0435\u0432 \u0421.\u0425. \u041d\u043e\u0432\u0430\u044f \u0441\u0430\u0439\u0442-\u0441\u043f\u0435\u0446\u0438\u0444\u0438\u0447\u0435\u0441\u043a\u0430\u044f \u044d\u043d\u0434\u043e\u043d\u0443\u043a\u043b\u0435\u0430\u0437\u0430 BspACI \u0438\u0437 BACILLUS PSYCHRODURANS AC \u0443\u0437\u043d\u0430\u0435\u0442 \u043f\u043e\u0441\u043b\u0435\u0434\u043e\u0432\u0430\u0442\u0435\u043b\u044c\u043d\u043e\u0441\u0442\u044c 5`-C^CGC-3`\/3`-GGC^G-5`. \/\/ \u0412\u0435\u0441\u0442\u043d\u0438\u043a \u0431\u0438\u043e\u0442\u0435\u0445\u043d\u043e\u043b\u043e\u0433\u0438\u0438 \u0438 \u0444\u0438\u0437\u0438\u043a\u043e-\u0445\u0438\u043c\u0438\u0447\u0435\u0441\u043a\u043e\u0439 \u0431\u0438\u043e\u043b\u043e\u0433\u0438\u0438 \u0438\u043c\u0435\u043d\u0438 \u042e.\u0410.\u041e\u0432\u0447\u0438\u043d\u043d\u0438\u043a\u043e\u0432\u0430. 2009. \u0422.5. \u21161. \u0421.16-24.<\/li>\n<\/ol>\n<p>[\/vc_column_text][\/vc_column][\/vc_row]<\/p>","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>\u0412 \u043d\u0430\u0441\u0442\u043e\u044f\u0449\u0435\u0439 \u0440\u0430\u0431\u043e\u0442\u0435 \u043e\u043f\u0438\u0441\u0430\u043d\u043e \u043a\u043b\u043e\u043d\u0438\u0440\u043e\u0432\u0430\u043d\u0438\u0435 \u0441\u0430\u0439\u0442-\u0441\u043f\u0435\u0446\u0438\u0444\u0438\u0447\u0435\u0441\u043a\u043e\u0439 \u043c\u0435\u0442\u0438\u043b\u0437\u0430\u0432\u0438\u0441\u0438\u043c\u043e\u0439 \u0414\u041d\u041a-\u044d\u043d\u0434\u043e\u043d\u0443\u043a\u043b\u0435\u0430\u0437\u044b GlaI \u0438 \u043f\u0440\u043e\u0432\u0435\u0434\u0435\u043d\u043e \u0441\u0440\u0430\u0432\u043d\u0435\u043d\u0438\u0435 \u0441\u0443\u0431\u0441\u0442\u0440\u0430\u0442\u043d\u043e\u0439 \u0441\u043f\u0435\u0446\u0438\u0444\u0438\u0447\u043d\u043e\u0441\u0442\u0438 \u0440\u0435\u043a\u043e\u043c\u0431\u0438\u043d\u0430\u043d\u0442\u043d\u043e\u0433\u043e \u0438 \u043d\u0430\u0442\u0438\u0432\u043d\u043e\u0433\u043e \u0444\u0435\u0440\u043c\u0435\u043d\u0442\u043e\u0432. \u041f\u0440\u043e\u0432\u0435\u0434\u0451\u043d\u043d\u044b\u0439 \u0430\u043d\u0430\u043b\u0438\u0437 \u0441\u0432\u043e\u0439\u0441\u0442\u0432 \u0440\u0435\u043a\u043e\u043c\u0431\u0438\u043d\u0430\u043d\u0442\u043d\u043e\u0439 \u044d\u043d\u0434\u043e\u043d\u0443\u043a\u043b\u0435\u0430\u0437\u044b GlaI \u043f\u043e\u043a\u0430\u0437\u0430\u043b, \u0447\u0442\u043e \u0441\u0443\u0431\u0441\u0442\u0440\u0430\u0442\u043d\u0430\u044f \u0441\u043f\u0435\u0446\u0438\u0444\u0438\u0447\u043d\u043e\u0441\u0442\u044c \u043d\u0430\u0442\u0438\u0432\u043d\u043e\u0433\u043e \u0438 \u0440\u0435\u043a\u043e\u043c\u0431\u0438\u043d\u0430\u043d\u0442\u043d\u043e\u0433\u043e \u0444\u0435\u0440\u043c\u0435\u043d\u0442\u0430 \u043d\u0435 \u043e\u0442\u043b\u0438\u0447\u0430\u044e\u0442\u0441\u044f, \u043d\u043e, \u0432\u0432\u0438\u0434\u0443 \u0431\u043e\u043b\u044c\u0448\u0435\u0433\u043e \u043a\u043e\u043b\u0438\u0447\u0435\u0441\u0442\u0432\u0430 \u0444\u0435\u0440\u043c\u0435\u043d\u0442\u0430 \u0432 \u0440\u0435\u043a\u043e\u043c\u0431\u0438\u043d\u0430\u043d\u0442\u043d\u043e\u043c \u0448\u0442\u0430\u043c\u043c\u0435, \u0435\u0433\u043e \u043a\u043e\u043d\u0446\u0435\u043d\u0442\u0440\u0430\u0446\u0438\u044f \u0432 \u043a\u043e\u043d\u0435\u0447\u043d\u043e\u043c \u043f\u0440\u0435\u043f\u0430\u0440\u0430\u0442\u0435 \u0431\u043e\u043b\u0435\u0435 \u0447\u0435\u043c \u0432 10 \u0440\u0430\u0437 \u043f\u0440\u0435\u0432\u044b\u0448\u0430\u0435\u0442 \u043a\u043e\u043d\u0446\u0435\u043d\u0442\u0440\u0430\u0446\u0438\u044e \u043d\u0430\u0442\u0438\u0432\u043d\u043e\u0433\u043e \u0444\u0435\u0440\u043c\u0435\u043d\u0442\u0430<\/p>\n","protected":false},"author":1,"featured_media":16,"comment_status":"open","ping_status":"open","sticky":false,"template":"","format":"standard","meta":{"footnotes":""},"categories":[22,30],"tags":[19],"coauthors":[8,12,9,10,25,11,14,16],"class_list":["post-136","post","type-post","status-publish","format-standard","has-post-thumbnail","hentry","category-enzyme-studies","category-volume2019","tag-gla-i"],"_links":{"self":[{"href":"https:\/\/dnape.online\/ru\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/136","targetHints":{"allow":["GET"]}}],"collection":[{"href":"https:\/\/dnape.online\/ru\/wp-json\/wp\/v2\/posts"}],"about":[{"href":"https:\/\/dnape.online\/ru\/wp-json\/wp\/v2\/types\/post"}],"author":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/dnape.online\/ru\/wp-json\/wp\/v2\/users\/1"}],"replies":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/dnape.online\/ru\/wp-json\/wp\/v2\/comments?post=136"}],"version-history":[{"count":12,"href":"https:\/\/dnape.online\/ru\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/136\/revisions"}],"predecessor-version":[{"id":343,"href":"https:\/\/dnape.online\/ru\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/136\/revisions\/343"}],"wp:featuredmedia":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/dnape.online\/ru\/wp-json\/wp\/v2\/media\/16"}],"wp:attachment":[{"href":"https:\/\/dnape.online\/ru\/wp-json\/wp\/v2\/media?parent=136"}],"wp:term":[{"taxonomy":"category","embeddable":true,"href":"https:\/\/dnape.online\/ru\/wp-json\/wp\/v2\/categories?post=136"},{"taxonomy":"post_tag","embeddable":true,"href":"https:\/\/dnape.online\/ru\/wp-json\/wp\/v2\/tags?post=136"},{"taxonomy":"author","embeddable":true,"href":"https:\/\/dnape.online\/ru\/wp-json\/wp\/v2\/coauthors?post=136"}],"curies":[{"name":"wp","href":"https:\/\/api.w.org\/{rel}","templated":true}]}}